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    HPLC測定小麥胚芽油營養膠囊維E含量

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    HPLC測定小麥胚芽油營養膠囊維E含量

    摘要】目的建立測定小麥胚芽油營養膠囊中維生素E含量的方法。方法采用hplc法,色譜柱為AgilentZORBAXODS柱,甲醇乙腈(體積比25∶75)為流動相,流速1.0mL/min,檢測波長290nm,柱溫為40℃。結果維生素E在32.9~291.1μg/mL范圍內呈良好的線性關系,平均回收率為99.9%,RSD為1.0%(n=6)。結論本文方法簡便、準確,能有效地控制該制劑的質量。

    【關鍵詞】小麥胚芽油營養膠囊;維生素E;高效液相色譜法

    Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminingthecontentofvitaminEinwheatgermoil.MethodsAnAgilentZORBAXODScolumnwasusedtoanalysisthesamplebyusingmethanolacetontril(25∶75)asmobilephase.Theflowratewas1.0mL·min-1anddetectivewavelength290nm.ResultsThestandardcurveforvitaminEwaslinearintheconcentrationrangeof32.9~291.1μg/mL.Theaveragerecoverywas99.9%withRSD1.0%(n=6).ConclusionThismethodissimple,accurateandreliableforthequalitycontrolofwheatgermoil.

    Keywords:wheatgermoilvitaminE;HPLC

    小麥胚芽油營養膠囊是中美合作安利(中國)日用品有限公司的產品,其主要成分為不飽和脂肪酸、維生素E、膽堿、植物固醇,還有谷胱甘肽等多種微量元素,具有抗不育、抗衰老、促進人體新陳代謝、增強體力和記憶力、降低膽固醇、防治動脈硬化、改善血液循環、增強人體免疫力的功能。其主要有效成分為維生素E,測定維生素E需要將樣品經過皂化、提取、洗滌、濃縮等步驟后再進行測定,操作繁瑣[1],本文參照文獻[2,3]對該制劑中維生素E含量測定方法進行研究,建立了一種簡便、準確的測定方法。

    1儀器與試劑

    島津LC10ATVP泵;SPDM10AVP檢測器;CTO10AVP柱溫箱;SCL10AVP自動進樣器;SIL10ADVP系統控制器;CLASSVP工作站;dlα維生素E(Dr.EhrenstorferCA17924300,純度98.6%);小麥胚芽油營養膠囊(由中美合作安利(中國)日用品有限公司提供,批號:20050217;20050312;20050326),甲醇、乙腈為色譜純。

    2實驗部分

    2.1溶液的制備

    2.1.1對照品溶液的制備精密稱取dlα維生素E對照品適量,加甲醇制成每1mL含100μg溶液,即得。

    2.1.2供試品溶液的制備取小麥胚芽油營養膠囊裝量差異項下的內容物,混勻,取0.2g,精密稱定,置20mL棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,搖勻,精密吸取2mL至10mL棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過(0.45μm),即得。

    2.2色譜條件及系統適應性試驗色譜柱為ODS柱(AgilentZORBA,250mm×46mm,5μm),流動相為甲醇乙腈(體積比25∶75),流速為1mL/min;檢測波長為290nm;柱溫為40℃。分別取對照品溶液、供試品溶液各10μL注入色譜儀,見圖1。

    A.對照品;B.樣品;C.陰性對照

    圖1HPLC色譜圖(略)

    Fig.1HPLCChromatograms

    2.3線性關系考察以維生素E對照品溶液(109.5446μg/mL)各分別進樣3、5、10、15和20μL進行測定,以質量濃度(ρ)為橫坐標,峰面積(A)為縱坐標,繪制標準曲線得回歸方程:A=4042.79ρ-19368.6,r=0.9999。結果表明,維生素E在32.9~219.1μg/mL范圍內,其進樣量與峰面積呈良好的線性關系。

    2.4精密度試驗取同一對照品溶液(109.5446μg/mL),重復進樣6次,結果維生素E平均峰面積為423530,RSD為0.39%。

    2.5重現性試驗取同一批樣品(批號20050217)6份,按“212”項方法制備供試品溶液并測定,結果維生素E的平均含量為18.1mg/粒,其RSD為0.82%。

    2.6穩定性試驗取同一供試品(批號20050217)溶液,分別于0、2、4、8、16、24h進樣10μL,測定峰面積,結果其RSD為0.88%,表明供試品溶液在24h內穩定。

    2.7加樣回收率試驗精密稱取已知含量的小麥胚芽油營養膠囊(批號20050217),取內容物約0.1g,精密稱定,共6份,分別精密加入對照品溶液(546.65μg/mL)10mL,置20mL棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,搖勻,精密吸取2mL至10mL棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,密塞,搖勻,用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續濾液作為供試品溶液,注入液相色譜儀,測定,結果見表1。

    表1維生素E回收率試驗結果(略)

    Tab.1RecoveryofvitaminEm

    2.8樣品測定取小麥胚芽油營養膠囊3批,照“212”項方法制備供試品溶液,分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL,按上述色譜條件測定,計算,結果3個批號20050217、20050312、20050326的樣品維生素E含量分別為18.1、18.2和180mg/粒。

    3討論

    3.1研究結果顯示,本文方法具有較好的線性關系、重復性與回收率,操作方便、迅速,結果準確。說明HPLC法測定小麥胚芽油營養膠囊中維生素E含量的可行性良好。

    3.2維生素E容易氧化,操作過程應注意避光,使用棕色容量瓶。

    【參考文獻】

    [1]王叔淳,王蔭國.強化食品中維生素A、D、E、K同時測定方法的研究[J].中華預防醫學雜志,1995,29(6):379-380.

    [2]沈穎.反相高效液相色譜法測定易善力軟膠囊中維生素E的含量[J].蘭州大學學報,2003,23(3):319-320.

    [3]吳虹,吳健.反相高效液相色譜法測定易沙棘油中維生素E的含量[J].安徽中醫學院學報,2002,21(1):47.

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