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    健肝靈膠囊中丹酚酸B含量

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    【摘要】建立高效液相色譜法測定健肝靈膠囊中丹酚酸B含量的方法。方法色譜柱:UltimateXB-C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流速:1.0ml/min;柱溫:25℃;流動相:乙腈-甲醇-甲酸-水(10:30:1:59);檢測波長:286nm;進樣量:10μl。結果丹酚酸B在濃度為20.22~161.76μg/ml時線性關系良好,r=0.9999,平均回收率為100.86%;RSD為1.6%(n=6)。結論該方法簡單、準確,可作為健肝靈膠囊的質量控制。

    【關鍵詞】高效液相色譜法健肝靈膠囊丹酚酸B

    【Abstract】ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminationofsalvianolicacidBinJianganlingcapsules.MethodsUltimateXB-C18column(5μm,4.6mm×250mm)wasusedwiththemobilephaseconsistedofacetonitrile-methanol-formicacid-water(10:30:1:59).Theflowratewas1.0ml/min.Thecolumntemperaturewas25℃andthedetectionwavelengthwas286nm.ResultsAgoodlinearrangewasshownattheconcentrationofsalvianolicacidBfrom20.22to161.76μg/ml(r=0.9999).Theaveragerecoveryratewas100.86%(RSD=1.6%,n=6).ConclusionThemethodissimpleandaccurate.ItcanbeusedforthequalitycontrolofJianganlingcapsules.

    【Keywords】RP-HPLC;Jianganlingcapsule;salvianolicacidB

    健肝靈膠囊由五味子種子浸出物、靈芝浸膏、丹參浸膏組成,具有益氣健脾、活血化瘀,降低谷丙轉氨酶的功能,用于急性、遷延性、慢性肝炎。丹參含有丹參酚、丹參素、丹參酮等多種活性成分,用于治療冠心病、心絞痛。近年又廣泛用于治療多種肝病,包括急慢性肝炎、脂肪肝、肝纖維化、肝腹水等。隨著藥理研究的深入,丹參治療在肝病方面顯示出越來越廣闊的前景。該制劑現只有對其五味子種子浸出物中含有的五味子甲素進行含量測定的方法,而方中的丹參浸膏含有多種水溶性活性成分,為完善標準,控制其產品質量,現采用反相高效液相色譜法對制劑中的丹酚酸B進行定量分析,建立了可靠、準確的質量控制方法。現報告如下。

    1儀器與試藥

    Agilent1200高效液相色譜儀;丹酚酸B對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號111562-200605);健肝靈膠囊(吉林白山正茂藥業股份有限公司,批號:20060401,20060705;吉林省輝南輝發制藥股份有限公司,批號:051102。規格均為:每粒裝0.5g),乙腈、甲醇均為色譜純,其他試劑均為分析純。

    2方法與結果

    2.1色譜條件色譜柱:UltimateXB-C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流速:1.0ml/min;柱溫:25℃;流動相:乙腈-甲醇-甲酸-水(10:30:1:59);檢測波長:286nm;進樣量:10μl。

    2.2對照品溶液制備精密稱取丹酚酸B對照品10.11mg,置50ml容量瓶中,用水溶解并定容至刻度,制成202.2μg/ml的貯備液。分別精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml,各置10ml量瓶中,加稀乙醇稀釋至刻度,分別制成20.22、40.44、80.88、121.32、161.76μg/ml的溶液,即得。

    2.3供試品溶液制備稱取本品內容物約2.5g,精密稱定,置于具塞錐形瓶中,精密加入水50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率400W,頻率80kHz)40min,放冷,再稱定重量,用水補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液通過0.45μm的微孔濾膜作為供試品溶液。

    2.4線性范圍分別精密量取“2.2”項下的丹酚酸B對照品溶液各10μl注入高效液相色譜儀進行測定,測量峰面積。以對照品濃度(μg)為橫坐標,峰面積為縱坐標,經線性回歸。結果表明:丹酚酸B在20.22~161.76μg/ml范圍內與峰面積線性關系良好。其回歸方程為:Y=3.26+11.61X,r=0.9999。

    2.5干擾試驗將除丹參浸膏的其他幾味藥按處方所述方法制成陰性供試品,按“2.3”項下操作,制成陰性供試品液。在相同色譜條件下進樣,色譜圖見圖1。

    A.對照品B.供試品C.不含丹參浸膏的陰性對照

    圖1健肝靈膠囊的色譜圖

    2.6精密度試驗精密量取上述對照品溶液(40.44μg/ml)10μl,連續進樣6次,記錄峰面積,結果峰面積RSD=0.8%(n=6)。

    2.7穩定性試驗精密吸取同一樣品溶液10μl,分別在0、3、6、9、12、18、24h進樣,結果24h內峰面積RSD=1.4%(n=7)。結果表明,供試液待測組分在24h內穩定。

    2.8重復性試驗取同一批號樣品6份,測定含量,結果表明,本方法重復性良好,丹酚酸B含量RSD=1.1%(n=6)。

    2.9加樣回收率試驗取同批號樣品6份,每份2.5g,分別加入丹酚酸B對照品適量,按“2.3”項操作,進樣,測得回收率,結果見表1。表1丹酚酸B加樣回收率試驗結果

    2.10樣品測定按“2.4”項下條件,分別測定3批健肝靈膠囊樣品含量,結果見表2。表2樣品含量測定

    3討論

    本方法采用高效液相色譜法測定樣品中丹酚酸B的含量,方法簡單、可靠,可作為健肝靈膠囊的質控指標之一。參考文獻報道方法[1~3],進行了樣品提取溶劑、提取方法和提取次數等因素的考察,結果表明以水為溶劑,采用超聲處理,效果較好,供試品中的丹酚酸B即可提取完全。

    【參考文獻】

    1國家藥典委員會.中國藥典,一部.北京:化學工業出版社,2005,527.

    2黃湘,劉丹,文萍.HPLC測定丹七片中丹酚酸B的含量.現代中藥研究與實踐,2007,21(6):43-45.

    3劉文琴.HPLC測定心舒顆粒中丹酚酸B的含量.中國中藥雜志,2007,32(23):2572-2573.

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