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    莫言臺灣

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    莫言臺灣范文第1篇

    臺灣地區(qū)應用型碩士培養(yǎng)模式2009年3月,全國專業(yè)學位教育指導委員會年度工作會議召開,會議提出了“積極調(diào)整碩士研究生的培養(yǎng)結構,改革研究生培養(yǎng)模式,加快培養(yǎng)應用型專門人才”。我國研究生教育結構逐步發(fā)生挑戰(zhàn),研究生培養(yǎng)從過去的學術性為主轉變?yōu)閼眯蜑橹鳎U大了應用型專業(yè)學位的招生數(shù)量。這種培養(yǎng)目標的轉型,標志著我國現(xiàn)有的單一的全日制研究生培養(yǎng)模式發(fā)生改變。在政策上,我國應用型碩士培養(yǎng)的口號早已打響,但實際情況并非如字面的轉換簡單。應用型碩士的培養(yǎng)模式構建,并非一朝一夕可以完成,社會企業(yè)對于目前培養(yǎng)出的應用型碩士也存在較大的質疑。針對應用型碩士培養(yǎng)出現(xiàn)的問題,本文以正修科技大學工學院為例,剖析其應用型碩士的培養(yǎng)模式,從而對我國大陸地區(qū)應用型碩士的培養(yǎng)提供建議。

    一、臺灣地區(qū)高等教育情況

    臺灣地區(qū)高等教育與大陸地區(qū)高等教育有所不同。大陸高等教育分為普通高等教育與高等職業(yè)教育;臺灣地區(qū)高等教育也是分為高等教育和技術與職業(yè)教育。普通高等教育主要是培養(yǎng)學術性專門人才,學生可由中學一直讀到博士學位。技術與職業(yè)教育主要是培養(yǎng)應用科學與技術的實用專業(yè)人才,包括高級職業(yè)學校、五年制專科、二年制專科、二年制技術學院或科技大學、四年制技術學院或科技大學,學生完成職業(yè)技術本科教育后,可進入研究所攻讀碩士班,如若繼續(xù)深造,還可以繼續(xù)讀博士班深造。以上兩種類型,上下銜接,左右貫通,形成一個渠道多樣、體系完整、交叉互通、具有暢通升學未來的職業(yè)技術教育一貫體系。臺灣地區(qū)高等教育,是兩個相互平行的教育系列,學生有權利選擇普通高等教育,開展學術研究,也可以通過職業(yè)教育學習,完成博士學位,成為高級應用型人才。臺灣地區(qū)應用型碩士,等同職業(yè)技術教育的碩士階段。筆者以臺灣地區(qū)正修科技大學工學院土木與工程資訊系為例,了解其應用型碩士的培養(yǎng)模式。

    二、正修科技大學工學院土木與資訊系應用型碩士培養(yǎng)模式

    (一)科系簡介

    正修科技大學工學院土木與資訊系成立于1965年,曾名正修工專土木工程科,1989年增設夜間部兩年制,1999年改制為工程土木系,招收大學部及進修部,2006年成立營建工程研究所,2007年更名為土木與工程資訊系。土木與工程系課程規(guī)劃:以土木工程技術為主題,以電腦應用為輔,并注重專業(yè)課程之實務教授以培育具有專精技能的現(xiàn)代土木技術人才。

    (二)入學要求

    1.公立或已立案之私立大學或獨立學院有關系畢業(yè),取得學士學位者。

    2.符合教育部認定標準之國外大學或獨立學院有相關系畢業(yè),取得學士學位者。

    3.合于以同等學歷(報考大學同等學歷認定標準――第三條)報考碩士班之規(guī)定者。

    從上可以看出,其入學要求有其特殊性。由于臺灣地區(qū)高等教育雙軌制的存在,其碩士招考范圍較大陸地區(qū)高校范圍廣,含有大學本科畢業(yè)生及職業(yè)技術類本科,專科(含工作經(jīng)驗、資格證等)均可以報告,參與碩士研究生的考試申請。大陸高等教育沒有達到雙軌制的教育系統(tǒng),在招生上達不到臺灣地區(qū)的招生靈活性、范圍廣泛性特點。

    (三)課程方面

    其課程體現(xiàn)了正修科技大學工學院與資訊系課程特征。從2013年的課程要求中,對于應用型碩士生課程的學分要求都差不多保持在30學分以上。研究生一年級上學期,有海外研習。這一點在大陸應用型碩士培養(yǎng)過程中很難看到。從其課程開設情況看,其開設的課程立足與實際生活、社會所需,具有較強的實際應用效用。

    (四)學制特點

    所有碩士均為2年學制,這點和大陸地區(qū)全日制工程碩士部分2.5年的不同。大陸地區(qū)高校一般都是采取先開設課程,然后實習加碩士論文撰寫,畢業(yè)。正修科技大學工學院土木與資訊系中營建工程研究所課程中,其課程與碩士論文處于同期,研究生二年級仍有課程需要學習,另外,也開展了碩士論文撰寫。

    (五)建教結合模式

    正修科技大學在建教結合方面較強的優(yōu)勢。原因有:臺灣地區(qū)教育政策,隨著臺灣地區(qū)產(chǎn)業(yè)結構和產(chǎn)業(yè)政策的變化而不斷地變化。臺灣地區(qū)不僅在《大學法》中明確規(guī)定大學要與政府機關、事業(yè)機關等進行產(chǎn)學合作,“教育部”還頒布了《建教合作實施辦法》,對建教合作的內(nèi)容、經(jīng)費、合作雙方的權利義務及簽訂的契約內(nèi)容進行詳細規(guī)定,從法律上保障了產(chǎn)學合作的實施。正修科技大學榮獲“教育部”典范科技大學示范基地,擁有7個產(chǎn)學研發(fā)中心。一方面,解決社會所需解決的問題;另一方面,給予研究生以實際接觸真實世界的基地,培養(yǎng)其解決實際問題的能力,增強其應用型碩士的實踐能力。

    三、啟示

    首先,從入學要求上看,正修科技大學應用型碩士的招考要求,較大陸高校應用型碩士招考有一定的靈活性、側重學生的實際能力等。這種做法,在招考中擴大了學生生源的數(shù)量,有利于學生入學的公平性,重視學生實際應用能力。

    其次,應注重課程的實際性,緊密結合實際生活所需、社會最需要解決的現(xiàn)實問題的解決上,注重課程實際效用性,提升學生的實踐動手能力。

    莫言臺灣范文第2篇

    關鍵詞:臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園;農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化;海峽兩岸

    中圖分類號:F329.6 文獻標志碼:A 文章編號:1001-862X(2012)06-0057-006

    海峽兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作是兩岸經(jīng)貿(mào)合作的重要組成部分,加強兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作,符合區(qū)域間以發(fā)揮比較優(yōu)勢、提高資源配置效率為目標的產(chǎn)業(yè)合作與要素流動規(guī)律,適應兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)和農(nóng)村經(jīng)濟發(fā)展及其轉型升級的要求。為推動兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作,大陸先后出臺了一系列政策措施,并批復設立了一批涉臺農(nóng)業(yè)園區(qū)。其中,臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園(簡稱“創(chuàng)業(yè)園”)即為典型代表與重要創(chuàng)新,引起了中央和學者高度重視。[1][2][3][4]2012年6月18日舉行的“第四屆海峽論壇”,共了包括進口臺灣大米以及促進兩岸教育、科技合作在內(nèi)的八個方面對臺惠民新舉措,引起了海內(nèi)外極大關注。本文擬在已有研究與政策規(guī)定的基礎上,簡要分析兩岸農(nóng)業(yè)合作的主要模式及其發(fā)展變化特點,重點分析、研究新形勢下創(chuàng)業(yè)園進一步發(fā)展創(chuàng)新的可能模式及其實現(xiàn)路徑問題,促進兩岸更廣領域、更高層次交流合作,加深兩岸基層民眾的了解與交流。

    一、兩岸農(nóng)業(yè)交流合作的歷程及主要模式分析

    20世紀80年代以來,兩岸農(nóng)業(yè)界不斷探索現(xiàn)代農(nóng)業(yè)交流合作的可行模式與途徑,近年來呈現(xiàn)出了“大發(fā)展、大交流、大合作、大融合”的良好趨勢。按照交流合作的內(nèi)容及其方式,其發(fā)展階段與模式特征如下。

    (一)早期合作模式

    兩岸農(nóng)業(yè)合作源遠流長,民間交流從來沒有中斷。但從總的看,在1997年大陸開始規(guī)劃建設“海峽兩岸農(nóng)業(yè)合作試驗區(qū)”之前,兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作仍處于起步探索階段,并以小額產(chǎn)品貿(mào)易和臺商試探性投資為主。此間,相關限制因素比較多,即使是大陸方面也沒有出臺針對性較強的專門政策法規(guī),呈現(xiàn)出了“規(guī)模較小、區(qū)域性較強和間接、分散”等方面特征,可將其統(tǒng)稱為起步階段的傳統(tǒng)模式。

    事實上,直到80年代末臺灣地區(qū)才逐步放開大陸農(nóng)產(chǎn)品進口。1987年首批開放了27項大陸農(nóng)工原料間接進口(后增至30項),此后兩年又陸續(xù)增加了60項,1996年祖國大陸則位居臺灣地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品出口市場的第17位,并以香港轉口貿(mào)易為主。農(nóng)業(yè)投資方面,1987年開放島內(nèi)民眾赴大陸探親以來,部分臺商就以“探親”為由,開始試探性小額投資。特別是1992年底,臺灣地區(qū)正式出臺了“在大陸地區(qū)從事投資或技術合作許可辦法”,除第一批開放的3000多項投資產(chǎn)業(yè)外,之后又增加了數(shù)百項,其中農(nóng)業(yè)類共計103項;為鼓勵并保護臺商投資,1994年大陸方面正式頒布了“臺胞投資法”。此間,農(nóng)業(yè)投資主要集中于勞動密集型產(chǎn)業(yè),包括種植業(yè)、畜牧業(yè)、水產(chǎn)與漁業(yè)、食品飲料及飼料加工、木竹等。[5]學術交流方面,直到1992年才實現(xiàn)雙向交流,且大陸同行均需繞道香港才有可能進入臺灣地區(qū),甚至“文到人不到”(1)。

    (二)現(xiàn)有主導模式:臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園

    經(jīng)過多年努力,90年代末兩岸雙邊合作已初具規(guī)模。但為更好發(fā)揮大陸自然資源與勞動力等優(yōu)勢,以及臺商資金、技術與管理方面優(yōu)勢,需要進一步創(chuàng)新合作的模式與平臺——“海峽兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作試驗區(qū)”和“臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園”應運而生。以創(chuàng)業(yè)園為例,據(jù)統(tǒng)計,自2006年福建漳浦和山東棲霞兩個國家級創(chuàng)業(yè)園批準設立以來,國臺辦和農(nóng)業(yè)部已先后在大陸的14個省份批復設立了29個國家級創(chuàng)業(yè)園,其中廣東、福建、江蘇、浙江4個省擁有17個創(chuàng)業(yè)園,約占3/5。[4]

    顯然,作為試驗區(qū)和創(chuàng)業(yè)園建設的先行者,在福建省率先形成與快速發(fā)展壯大也有其客觀必然性。一是閩臺情緣深厚,約80%的臺灣民眾祖籍在福建,二是臺商投資及時獲益與宣傳帶動,三是各級政府的優(yōu)質服務與積極推動。由于臺灣地區(qū)市場狹小、土地資源緊缺,從1987年起一些臺商便以“探親”名義在大陸投資創(chuàng)業(yè),其投資地區(qū)又以祖籍地或經(jīng)親友們介紹的合適地點為主。這些投資獲得初步成功后,受利益驅動和當?shù)卣姆e極推動,更多的臺商前往福建、江蘇等地投資興業(yè),這些地方也就逐步發(fā)展成為臺商投資的相對集中區(qū),試驗區(qū)和創(chuàng)業(yè)園的規(guī)劃與建設也就水到渠成。調(diào)查中筆者也發(fā)現(xiàn),福建漳平(永福)創(chuàng)業(yè)園正是在早期落戶臺資農(nóng)企的大力帶動與當?shù)卣e極推動下逐步發(fā)展起來的,現(xiàn)已成為大陸規(guī)模最大的臺灣軟枝烏龍茶生產(chǎn)聚集地,并成為特色創(chuàng)業(yè)園發(fā)展壯大的重要典型。此間,兩岸農(nóng)產(chǎn)品貿(mào)易、農(nóng)業(yè)投資、學術交流、合作研發(fā)的內(nèi)容不斷增多,形式日益豐富,規(guī)模不斷擴大,特別是創(chuàng)業(yè)園已成為兩岸農(nóng)業(yè)交流合作及其發(fā)展創(chuàng)新的重要成果和重要載體,可望成為帶動地方經(jīng)濟發(fā)展和“三化同步”戰(zhàn)略的重要增長極。[1][2][4][6]

    (三)未來合作模式

    盡管創(chuàng)業(yè)園建設方興未艾,但目前仍停留在大陸土地與勞動力資源和臺灣地區(qū)資金、技術與管理經(jīng)驗等的初步結合與集聚上,創(chuàng)業(yè)園自身建設及其輻射與帶動能力有待進一步增強,進而發(fā)展成為兩岸經(jīng)貿(mào)合作互利雙贏的重要實踐平臺,推進兩岸“更廣領域、更高層次”合作。可以想象,一是隨著兩岸關系進入鞏固深化的新階段,以及大陸相關部門管理水平與服務能力的不斷增強,各級各類創(chuàng)業(yè)園將有所增加,建設的內(nèi)容與形式將更加豐富,有條件的省級創(chuàng)業(yè)園將積極申報、建設成為國家級創(chuàng)業(yè)園;二是隨著創(chuàng)業(yè)園自身不斷發(fā)展壯大,園區(qū)配套設施與管理將日益完善,兩岸農(nóng)戶(或農(nóng)企)進駐數(shù)量與規(guī)模將持續(xù)擴大,園區(qū)產(chǎn)業(yè)鏈與合作成果的覆蓋范圍也將不斷拓展,特別是合作研發(fā)、推廣培訓與區(qū)域性專業(yè)市場建設將不斷推進,搶占經(jīng)濟和科技競爭制高點;三是創(chuàng)業(yè)園建設將與祖國大陸“三化同步”戰(zhàn)略(2)有機融合,其產(chǎn)業(yè)特色、經(jīng)濟效益與示范、帶動能力將不斷增強,達到“以合作興三化,以三化促合作”的良好局面,進而與周邊工業(yè)園區(qū)(或臨港工業(yè)基地等)一起發(fā)展成為更廣領域、更高層次的兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū),促進兩岸關系發(fā)展和區(qū)域經(jīng)濟一體化。

    二、臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園的發(fā)展思路及其實現(xiàn)路徑

    已有研究表明,盡管大陸各地、各級臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園起始建設時間、資源環(huán)境與產(chǎn)業(yè)基礎等方面各不相同,建設進展與成效各異,但創(chuàng)業(yè)園開創(chuàng)了兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作的新模式、新途徑。[1][2][3]新形勢下,“是否”及“如何”更好地推動創(chuàng)業(yè)園自身建設與管理,充分發(fā)揮其示范與帶動效應,乃至于“能否”及“如何”以若干特色、優(yōu)勢創(chuàng)業(yè)園為基礎逐步規(guī)劃、建設“海峽兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)”等,分析研究如下。

    (一)增加園區(qū)數(shù)量,擴大建設規(guī)模

    1.創(chuàng)業(yè)園的申請與升級。當前創(chuàng)業(yè)園建設明顯呈現(xiàn)出“東部較多、中西部較少”的分布格局[3][6],新形勢下中西部地區(qū)如何充分整合當?shù)剜l(xiāng)村旅游資源、農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)示范區(qū)等項目建設,高標準、高起點規(guī)劃和建設富有地方特色的新型創(chuàng)業(yè)園區(qū),具有較大提升空間。首先,臺商投資基礎較好、現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展水平相對較高的那些地方,如果已經(jīng)建有省、地級創(chuàng)業(yè)園或相關科技示范區(qū),建議重點考慮如何進一步提升科技水平、延長產(chǎn)業(yè)鏈,不斷增強園區(qū)品牌與產(chǎn)業(yè)特色、市場競爭力及其示范與帶動能力,努力申報、建設成為國家級創(chuàng)業(yè)園;否則,建議從當?shù)貙嶋H及全國創(chuàng)業(yè)園建設實際出發(fā),抓緊研究、規(guī)劃以市場前景和經(jīng)濟效益較好的當?shù)靥厣N植業(yè)、畜牧業(yè)或水產(chǎn)養(yǎng)殖及其加工業(yè)為主導的專業(yè)園區(qū)建設。其次,那些特色農(nóng)業(yè)資源較豐富但臺商投資較為薄弱的地區(qū),可以考慮與當前現(xiàn)代農(nóng)業(yè)建設、“三化同步”戰(zhàn)略相結合,通過制定科學發(fā)展規(guī)劃與大型項目招商,并扶持、鼓勵當?shù)剞r(nóng)戶(或企業(yè))與臺商合資(或合作)經(jīng)營相關項目,逐步培育臺商農(nóng)業(yè)投資集聚地與科技示范基地,進而申報省一級或直接申報、建設國家級創(chuàng)業(yè)園。

    2.擴大創(chuàng)業(yè)園建設規(guī)模。創(chuàng)業(yè)園一般由核心區(qū)、示范區(qū)和輻射區(qū)組成,通常覆蓋多個鄉(xiāng)鎮(zhèn),甚至跨越縣市和地區(qū)。但隨著創(chuàng)業(yè)園建設的穩(wěn)步推進,一些園區(qū)原有面積已經(jīng)無法滿足當?shù)貎砂冬F(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求,亟待向外拓展乃至合并附近園區(qū),或重新規(guī)劃建設。主要理由與依據(jù),一是創(chuàng)業(yè)園在發(fā)展建設過程中延伸出了許多新的需求,如:科技服務中心、農(nóng)產(chǎn)加工與配送中心、配套(或新興)產(chǎn)業(yè)合作基地、臺商生活與休閑區(qū)等,而且園區(qū)面積的適當擴大也是為了更好地適應未來創(chuàng)業(yè)園發(fā)展升級的需要;二是作為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)建設重要示范基地之一,經(jīng)過多年發(fā)展,創(chuàng)業(yè)園已對周邊地區(qū)形成了一定輻射與帶動作用。但當前周邊地區(qū)試探性生產(chǎn)園區(qū)優(yōu)良品種或先進適用技術應用,大多呈現(xiàn)出“自發(fā)、分散、無序”狀態(tài),客觀上對創(chuàng)業(yè)園建設與管理也提出了許多新的要求,特別是創(chuàng)業(yè)園發(fā)展規(guī)劃“是否”及“如何”更好地與區(qū)域特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)發(fā)展與培育相結合,不斷增強園區(qū)引種與研發(fā)等方面成果的輻射與帶動作用。此外,當前一個創(chuàng)業(yè)園跨越不同行政區(qū),以及個別地市擁有一個以上創(chuàng)業(yè)園,或不同創(chuàng)業(yè)園間的實際距離較近等情況并存,如跨行政區(qū)域的安徽和縣創(chuàng)業(yè)園、江蘇江寧創(chuàng)業(yè)園,以及福建省三明市的永安創(chuàng)業(yè)園和清流創(chuàng)業(yè)園等。隨著創(chuàng)業(yè)園建設不斷推進和服務管理日益規(guī)范化,未來跨地市、甚至跨省區(qū)相鄰(或同類)創(chuàng)業(yè)園間的擴并與整合,將成為可能與必須。

    (二)加強自主研發(fā)及其成果應用

    1.增強研發(fā)的意識與能力。科學技術是第一生產(chǎn)力。只有將現(xiàn)代生產(chǎn)要素向產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后階段滲透和擴散,將高新技術不斷應用到關聯(lián)產(chǎn)業(yè)中去,才能拓展和延伸農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈,增強產(chǎn)品或服務的市場競爭力。何況隨著市場意識、科技意識和知識產(chǎn)權保護意識的增強,新形勢下單純引進臺灣優(yōu)良品種和先進技術進行簡單生產(chǎn)(或規(guī)模經(jīng)營)的現(xiàn)有模式已不能滿足創(chuàng)業(yè)園發(fā)展壯大的需要,如何從創(chuàng)業(yè)園自身及兩岸科技園區(qū)間逐步交流合作的實際出發(fā),努力增強適用技術研發(fā)及其成果應用等方面合作,形成擁有自主知識產(chǎn)權的新品種和先進技術,將是今后努力的目標與發(fā)展的方向。實踐證明,一些臺資企業(yè),特別是龍頭企業(yè),有能力獨立研發(fā)新品種或實用技術,或者主動購買兩岸有關部門相關科研成果。以福建漳浦創(chuàng)業(yè)園的鎮(zhèn)宇生物科技有限公司為例,該公司不僅從事蘭花種苗培育、種植、銷售及示范推廣,還培育出了系列蝴蝶蘭新品種300多個。為此,除了要大力宣傳、適時獎勵創(chuàng)業(yè)園生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)成功研發(fā),并推廣其研究成果等,還要為臺商加強研發(fā)與成果推廣創(chuàng)造良好科研環(huán)境與成果展示平臺。既包括大陸相關科技項目的申請、研發(fā)、推廣與驗收指導,也包括如何在完善兩岸科學技術交流與交易機制的同時,讓臺灣地區(qū)科技工作者也能參與到創(chuàng)業(yè)園豐富多彩的研發(fā)實踐中,等等。

    2.推進成果研發(fā)及其應用。引進并研發(fā)出具有當?shù)靥厣膬?yōu)良品種與先進適用技術,適時推廣、應用到周邊地區(qū),已成為創(chuàng)業(yè)園建設與當?shù)叵嚓P產(chǎn)業(yè)發(fā)展壯大的重要一環(huán)。否則,不僅當?shù)仄胀ㄞr(nóng)戶無力承擔昂貴的新要素搜尋與試用成本,也將影響甚至切斷創(chuàng)業(yè)園適用技術的推廣和產(chǎn)業(yè)鏈延伸。為此,一是要將創(chuàng)業(yè)園建設成為兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作重要成果的展示平臺,特別是要根據(jù)當?shù)刭Y源環(huán)境和產(chǎn)業(yè)基礎,建立新品種、新技術、新市場和現(xiàn)代營銷方法等的綜合展示窗口;二是要建立與之相配套的適用技術推廣與培訓平臺,使創(chuàng)業(yè)園生產(chǎn)經(jīng)營者與基層農(nóng)戶能較好接受創(chuàng)業(yè)園現(xiàn)代科學技術的輻射與帶動作用。既包括指導和鼓勵當?shù)丶夹g推廣部門與園區(qū)共建適用技術培訓與推廣應用平臺,如合作設立農(nóng)廣校或培訓中心,并就良種獲取、生產(chǎn)經(jīng)營與管理技巧等進行充分講解,也包括臺企適時開設企業(yè)與產(chǎn)品宣講會,及時展示先進技術、經(jīng)營理念及所取得的實效,建立健全有效提升企業(yè)員工和當?shù)剞r(nóng)戶專業(yè)技術與經(jīng)營管理技能的服務培訓體系。

    (三)推進產(chǎn)業(yè)升級與園區(qū)間合作

    1.做大做強特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)。特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)是以區(qū)域特色資源為基礎、以特色產(chǎn)品生產(chǎn)與研發(fā)為核心、具有比較優(yōu)勢的產(chǎn)業(yè)體系。由于獨特土壤、氣候、海拔高度以及其他因素的影響,特色產(chǎn)品往往具有同類產(chǎn)品不可比擬的特征與經(jīng)濟價值。[7]當前,各地主要創(chuàng)業(yè)園基本形成了各具特色的主導產(chǎn)業(yè),如福建省漳浦創(chuàng)業(yè)園的花卉、漳平創(chuàng)業(yè)園的茶葉、仙游創(chuàng)業(yè)園的甜柿以及清流創(chuàng)業(yè)園的園林苗木等。顯然,創(chuàng)業(yè)園建設“能否”及“如何”做大做強特色產(chǎn)業(yè),健全特色產(chǎn)品生產(chǎn)、研發(fā)與加工體系,努力延長產(chǎn)品生命周期與產(chǎn)業(yè)鏈,對當?shù)噩F(xiàn)代農(nóng)業(yè)與農(nóng)村經(jīng)濟發(fā)展的影響與意義重大。為此,一是要建立符合當前與當?shù)貙嶋H的特色產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)基地;二是要培育特色產(chǎn)業(yè)龍頭企業(yè),包括引進和培育臺資農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè);三是要強化區(qū)域品牌建設,通過特色農(nóng)產(chǎn)品質量安全與品牌建設,帶動園區(qū)品牌與市場競爭力建設;四是要打造區(qū)域性特色農(nóng)產(chǎn)品專業(yè)市場及市場信息服務體系,打通產(chǎn)品產(chǎn)—加—銷的通路和網(wǎng)上銷售渠道。需要強調(diào)指出的是,休閑農(nóng)業(yè)具有較明顯的經(jīng)濟、社會與生態(tài)效益,部分創(chuàng)業(yè)園發(fā)展規(guī)劃中也涵蓋了這方面內(nèi)容,但實際情況并不理想。[8]建議進一步借鑒臺灣地區(qū)休閑農(nóng)業(yè)規(guī)劃理念與發(fā)展經(jīng)驗,努力將有條件的創(chuàng)業(yè)園打造成為集生產(chǎn)、消費與休閑娛樂于一體的現(xiàn)代農(nóng)業(yè)多功能區(qū)。

    2.加強創(chuàng)業(yè)園的對外合作。現(xiàn)代農(nóng)業(yè)具有明顯的動態(tài)性、層次性,不同時期和不同地區(qū)農(nóng)業(yè)合作的內(nèi)涵、標準與層次也不盡相同,各創(chuàng)業(yè)園在發(fā)展建設過程中也要注意不斷提升和完善對外合作的內(nèi)容與形式。起步較早、經(jīng)濟條件較好的沿海地區(qū),其建設進展與合作層次一般要高于中西部地區(qū)。建議中西部地區(qū)創(chuàng)業(yè)園要主動加強與東部地區(qū)先進創(chuàng)業(yè)園間的交流與合作,間接引進、消化并進一步創(chuàng)新符合當?shù)匕l(fā)展需要的臺灣地區(qū)優(yōu)良品種、先進技術和管理經(jīng)驗,同時借鑒東部地區(qū)對臺交流合作的重要模式與建設管理經(jīng)驗,提高合作的水平與效率;東部地區(qū)創(chuàng)業(yè)園則要充分發(fā)揮其先導作用和特有優(yōu)勢,繼續(xù)“先行先試”,積極謀求更廣領域、更高層次的產(chǎn)業(yè)合作與共同研發(fā)。與此同時,近年來海峽兩岸規(guī)劃建設了不同類型的科技園區(qū)(或示范區(qū)、研發(fā)中心等),如臺灣地區(qū)明確提出要繼續(xù)推進農(nóng)業(yè)科技園區(qū)建設,并以這些園區(qū)為依托建設世界級花卉島、世界熱帶及亞熱帶水果研發(fā)中心、亞太種畜種苗中心等。顯然,新形勢下不僅要加強東、中、西部地區(qū)創(chuàng)業(yè)園區(qū)間的交流合作,還應加強創(chuàng)業(yè)園區(qū)與兩岸各級各類科技園區(qū)間的交流與合作。但這方面工作尚未引起高度重視,亟待積極推進,包括支持、鼓勵兩岸科技園區(qū)間及時建立姐妹關系,同時從合作研發(fā)、推廣培訓及專門管理人才的培養(yǎng)等方面,攜手支持、推進創(chuàng)業(yè)園建設。若以近年大陸沿海省份積極推動的海洋漁業(yè)為例,除了要適時推動、加快海洋漁業(yè)特色創(chuàng)業(yè)園建設外,還要加強與臺灣地區(qū)宜蘭縣海洋生物科技園區(qū)、臺東縣海水生物技術園區(qū)、南方海洋園區(qū)等的合作,積極探索漁業(yè)育苗、養(yǎng)殖、加工技術,乃至海岸帶養(yǎng)護等方面技術合作。

    (四)構建區(qū)域性農(nóng)產(chǎn)品專業(yè)市場

    1.特色產(chǎn)品專業(yè)市場建設。近年來,臺商農(nóng)業(yè)投資逐漸向資源稟賦與服務管理較好的創(chuàng)業(yè)園或試驗區(qū)等地集中,形成了一批產(chǎn)業(yè)特色顯著、生產(chǎn)集中度高、經(jīng)營規(guī)模較大而且具有一定影響力的農(nóng)業(yè)合作基地。隨著兩岸關系發(fā)展和產(chǎn)銷格局變化,客觀上要求逐步建立起與之相配套的特色農(nóng)產(chǎn)品專業(yè)市場,提升產(chǎn)業(yè)綜合競爭力和創(chuàng)業(yè)園可持續(xù)發(fā)展能力。如上述被譽為“大陸阿里山”的福建漳平創(chuàng)業(yè)園,是臺資茶葉企業(yè)的重要集聚地,約占臺資茶葉企業(yè)總數(shù)的4/5,面積達5.5萬畝。但調(diào)查中筆者發(fā)現(xiàn),創(chuàng)業(yè)園內(nèi)臺資茶企最擔心的問題,就是茶葉的銷售通路問題,特別是當?shù)夭枞~專業(yè)市場建設明顯滯后于茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展壯大。值得注意的是,福建漳浦創(chuàng)業(yè)園擁有世界知名的、大陸首家在香港上市的臺資茶葉集團——天福集團,再加上安溪鐵觀音、漳平水仙茶、武夷巖茶等地方名茶快速發(fā)展,福建省已成為經(jīng)營規(guī)模大、生產(chǎn)集中度高、品種齊全且在海峽兩岸均具有重要影響力的茶葉生產(chǎn)基地,“海峽兩岸茶葉專業(yè)市場”的規(guī)劃與建設刻不容緩。以福建省為例,除了規(guī)劃建設中的海峽兩岸“水產(chǎn)品市場”和“水果集散中心”外,目前還有兩大專業(yè)市場亟需建設,一是海峽兩岸茶葉專業(yè)市場,二是海峽兩岸花卉專業(yè)市場。從2008年首屆武夷山國際茶文化節(jié)隆重推出以及近年福建漳平和漳浦創(chuàng)業(yè)園發(fā)展實際看,兩岸合作建設區(qū)域性茶葉市場已成必然。值得一提的是,漳浦創(chuàng)業(yè)園建設規(guī)劃已明確包含了海峽(漳州)花卉集散中心,盡管該項目尚處于建設階段,但已吸引了大批花卉投資商,建議加快建設進度并適時升級。

    2.合作構建農(nóng)產(chǎn)運銷體系。臺灣地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品流通體系主要由批發(fā)市場、超級零售市場和拍賣市場組成,實行政府調(diào)控下的市場交易,其渠道多元,交易方式靈活多樣,特別是農(nóng)會、農(nóng)聯(lián)社、青果社、國聯(lián)社等,積極開展產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后服務,推動了農(nóng)業(yè)標準化、市場化、規(guī)模化、信息化與服務社會化的進程。以農(nóng)產(chǎn)品批發(fā)市場為例,臺北農(nóng)產(chǎn)運銷股份有限公司由公股45.52%(其中“農(nóng)委會”22.76%、臺北“市政府”22.76%)與民股54.48%(其中農(nóng)產(chǎn)品販運商及其他20.21%、青果運銷合作社9.48%、各級農(nóng)會24.79%)組成,先后建立了臺北市第一和第二果菜批發(fā)市場,1988年又分別與日本福岡大同青果株式會社、上海市江橋批發(fā)市場經(jīng)營管理有限公司結為姐妹公司,拓展地區(qū)間的交流與合作。事實上,該公司集散功能強大,每天下午來自全臺各地的果菜,次日凌晨3:20起陸續(xù)拍賣,約2000公噸新鮮果菜在2~3小時全部交易完成,快速分散至各地區(qū)零售給消費者。建議進一步研究、借鑒其高效運作方式與管理經(jīng)驗,加強兩岸在上述專業(yè)市場建設以及高效農(nóng)產(chǎn)運銷體系打造等方面合作,加快農(nóng)業(yè)市場化、信息化和社會化服務體系構建,促進產(chǎn)品銷售與區(qū)域品牌培育。如漳平創(chuàng)業(yè)園已經(jīng)建立了很具地區(qū)特色的專業(yè)合作社,以符合創(chuàng)業(yè)園建設與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求。

    (五)從創(chuàng)業(yè)園到兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)

    1.兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)建設實踐。需要強調(diào)指出的是,當前已出現(xiàn)了以創(chuàng)業(yè)園為基礎規(guī)劃,建設兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)的初步實踐。以浙江省蒼南縣創(chuàng)業(yè)園為例,隨著創(chuàng)業(yè)園建設與當?shù)亟?jīng)濟快速發(fā)展,該縣通過整合蒼南臨港產(chǎn)業(yè)基地、蒼南省級工業(yè)園區(qū)、霞關對臺貿(mào)易物流園等多個區(qū)塊,已著手規(guī)劃建設260平方公里的浙臺(蒼南)經(jīng)濟合作區(qū)。目前,該合作區(qū)規(guī)劃以“挺進海洋、融入海西、對接臺灣、領跑浙江”為己任,積極承接“臺灣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、先進制造業(yè)和現(xiàn)代服務業(yè)”;并以加快“平臺設施建設”和“創(chuàng)新經(jīng)貿(mào)合作體制機制”為支撐,全方位、多層次、寬領域開展對臺經(jīng)貿(mào)合作、文化交流和人員往來,努力建設成為“國內(nèi)一流的兩岸經(jīng)貿(mào)交流與合作平臺”和“沿海先進制造業(yè)重要基地、港口物流基地、民營經(jīng)濟創(chuàng)新發(fā)展示范區(qū)”。福建省漳平市也在國家級創(chuàng)業(yè)園快速發(fā)展基礎上,努力規(guī)劃建設海西(漳平)臺商投資區(qū),未來將向兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)推進。

    2.規(guī)劃并建設經(jīng)貿(mào)合作區(qū)。創(chuàng)業(yè)園發(fā)展壯大的過程,將是兩岸經(jīng)貿(mào)合作不斷推進與產(chǎn)業(yè)融合不斷深化的過程。在新形勢下,那些有條件的特色創(chuàng)業(yè)園所在地,宜進一步規(guī)劃、整合當?shù)剞r(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)示范基地、相關工業(yè)園區(qū)及其配套服務體系等,努力建設海峽兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū)。這既是創(chuàng)業(yè)園融入“三化同步”戰(zhàn)略,實現(xiàn)合作領域不斷拓展、合作層次逐漸提升的重要體現(xiàn),也是兩岸經(jīng)貿(mào)合作朝縱深方向發(fā)展的重要途徑,是區(qū)域特色產(chǎn)業(yè)發(fā)展與兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作成果的及時鞏固與發(fā)展創(chuàng)新。但在經(jīng)貿(mào)合作區(qū)規(guī)劃建設過程中,應首先明確此類合作區(qū)的特殊定位、基本條件和創(chuàng)業(yè)園的獨特地位,做好可行性論證;其次是要做好合作區(qū)的發(fā)展規(guī)劃與配套服務設施建設,努力創(chuàng)新相關政策措施。其中,作為合作區(qū)的“綠色心臟”,創(chuàng)業(yè)園是合作區(qū)內(nèi)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)良種引繁中心、現(xiàn)代科學技術研發(fā)與推廣培訓中心,是綠色食品、保健品以及飲料類等健康產(chǎn)品加工業(yè)、木竹制造業(yè)及其相關創(chuàng)意產(chǎn)品原材料等的重要來源地與加工集散中心,同時也是休閑旅游業(yè)發(fā)展壯大的重要資源與特色所在。與此同時,要特別注意做好整個規(guī)劃的配套服務工作,如用地布局、道路交通以及環(huán)境保護等方面規(guī)劃與建設。

    三、進一步分析與討論

    近年來,特別是隨著兩岸“大三通”、MOU和ECFA等系列協(xié)議的順利簽訂與逐步實施,兩岸經(jīng)貿(mào)合作呈現(xiàn)出“大交流、大合作、大發(fā)展、大融合”的良好局面,兩岸關系逐漸進入鞏固深化期。隨著經(jīng)濟全球化和區(qū)域經(jīng)濟一體化進程加快,海峽兩岸迫切需要在WTO與ECFA框架下進一步提高認識,努力整合兩岸優(yōu)勢資源、提高稀缺資源配置與使用效率,在激烈國際競爭中實現(xiàn)互利雙贏。

    已有研究和上述分析表明,近年來海峽兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)交流合作中逐步發(fā)展、創(chuàng)新出來的各地、各級臺灣農(nóng)民創(chuàng)業(yè)園,在集聚兩岸現(xiàn)代生產(chǎn)要素、促進當?shù)亍叭健焙屯苿觾砂督?jīng)貿(mào)合作中取得了一定成效,但也存在著發(fā)展定位不夠明確,配套服務體系亟待跟進,相關政策法規(guī)有待落實,技術溢出水平較低等方面問題。建議未來大陸方面除繼續(xù)批復、高標準建設若干國家級創(chuàng)業(yè)園,切實保障臺商和當?shù)鼐用窠?jīng)濟、社會和生態(tài)利益外,有條件的省區(qū)可逐步增設省、市級涉臺農(nóng)業(yè)園區(qū),酌情引進臺灣地區(qū)現(xiàn)代生產(chǎn)要素并且努力發(fā)揚光大,包括加強配套實用技術的引進、研發(fā)與推廣應用,推進特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)升級和區(qū)域性專業(yè)市場構建,甚至以此為基礎逐步規(guī)劃、建設兩岸經(jīng)貿(mào)合作區(qū),等等。

    需要強調(diào)指出的是,臺灣地區(qū)正是在地少人多、農(nóng)業(yè)資源缺乏、自然災害頻繁等不利條件下,通過有計劃地推動各階段農(nóng)業(yè)建設、技術開發(fā)和相關措施投入,不斷以創(chuàng)新的農(nóng)業(yè)科技引領現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展,創(chuàng)造出了諸如蓮霧、香蕉與蝴蝶蘭的組織培養(yǎng),高接梨、冬季葡萄以及熱帶水果的產(chǎn)期調(diào)節(jié),白毛鴨、三品種雜交豬的培育,魚蝦類人工繁殖,以及近海箱網(wǎng)養(yǎng)殖等先進、高效技術,走出了一條獨具特色的農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展道路。目前,正朝“優(yōu)質、安全、休閑、生態(tài)”的現(xiàn)代永續(xù)農(nóng)業(yè)轉型升級,同時加快現(xiàn)代通訊技術的應用,不斷推動現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展成為“知識產(chǎn)業(yè)”。顯然,新形勢下,海峽兩岸均要更加注意增強和發(fā)揮現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的“多功能性”,通過將以“提高生產(chǎn)力”為目標的政策措施,逐步轉變?yōu)橐浴霸鰪姼偁幜Α睘楹诵牡陌l(fā)展策略,加快推進以“增產(chǎn)”為目標的“數(shù)量經(jīng)濟”向以“增值”為核心的“知識經(jīng)濟”轉變的進程,努力創(chuàng)造符合當前兩岸實際和國際市場需求的優(yōu)質產(chǎn)品和服務,推進大陸“三化同步”和兩岸現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)轉型升級。

    綜上,我們有理由相信,在兩岸官方、企業(yè)(或農(nóng)戶)、高校和科研院所等的共同努力下,未來兩岸現(xiàn)代農(nóng)業(yè)合作及其發(fā)展創(chuàng)新將蒸蒸日上,從而帶動更廣領域、更高層次的交流與合作。

    注釋:

    (1)“文到人不到”是指“1988年1月,臺灣地區(qū)學術界邀請廈門大學陳孔立教授赴臺交流,但陳教授到達香港后,臺灣‘當局’卻不批準他入臺,其論文最后由臺灣地區(qū)同行在研討會上代為宣讀”。

    (2)“三化同步”戰(zhàn)略是指“在工業(yè)化、城鎮(zhèn)化深入發(fā)展中同步推進農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化”,是我國“十二五”時期重大發(fā)展戰(zhàn)略之一。

    參考文獻:

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    莫言臺灣范文第3篇

    關鍵詞 親水作用色譜; 串聯(lián)質譜; 完整糖肽; 碰撞誘導解離; 高能誘導解離; 電子轉移解離

    1引言

    蛋白質的糖基化修飾是生物體內(nèi)普遍存在的一種重要翻譯后修飾方式[1,2],但其研究面臨很多挑戰(zhàn)。糖基化修飾具有多樣性。糖基化修飾沒有任何模板[3],而是由200多種糖基轉移酶調(diào)控,同一蛋白質的不同位點的修飾水平不一,同一位點所攜帶的糖鏈也存在多種結構,這給分析技術和軟件工具帶來了巨大挑戰(zhàn);目前完整糖肽的分析手段有限,主要以質譜分析為主,但由于糖肽修飾的微不均一性,及在質譜中離子化困難、碎裂情況復雜等特點,嚴重制約了完整糖肽的富集和質譜分析技術的發(fā)展。

    2012年,Doerr等[4]總結了糖蛋白質結構解析的經(jīng)典研究手段,并指出主要的研究方法是先將糖鏈從蛋白上釋放,然后分別對兩者進行解析,這導致了蛋白與糖鏈之間聯(lián)系的缺失。聚糖結構解析[5],可以解析大量糖鏈結構,卻忽視了糖鏈的來源;蛋白部分研究[6],可以得到明確的蛋白序列及大規(guī)模糖基化位點,卻丟失了糖鏈信息。Nakano等[7]研究發(fā)現(xiàn),特異位點的糖基化修飾影響生物學功能,這表明位點特異性水平的糖基化修飾研究對進一步闡釋糖蛋白質的生理功能及其在病理過程中的變化具有重要意義。因此,開發(fā)完整糖肽水平的研究方法,保留蛋白質與聚糖之間的連接,已成為當前的研究熱點。

    完整糖肽的復雜結構對分析方法的制約,需要從富集和鑒定兩方面解決。首先是由不均一性導致的糖肽低化學計量水平,及其在質譜中離子化效率不高而受非糖肽信號抑制的問題。可以通過完整糖肽的富集與分離,去除非糖肽的干擾而提高糖肽的相對豐度。目前應用于富集糖蛋白/糖肽的方法主要有凝集素[8]、二氧化鈦[9]、酰肼[10]和親水相互作用色譜(Hydrophilic interaction liquid chromatography, HILIC)[11]等。其中,HILIC是基于富含多羥基的糖鏈結構的強親水特性,而使糖肽與非糖基化肽段得以分離。HILIC對不同類型的糖肽沒有偏性,且能保持糖鏈結構的完整性,適合作為完整糖肽結構研究中的富集技術。其次,完整糖肽包含肽段和糖鏈兩部分,其結構和連接方式的差異導致兩者在串聯(lián)質譜中的碎裂行為有較大的區(qū)別,僅采用經(jīng)典的碰撞誘導解離(Collisioninduced dissociation, CID)碎裂不能有效得到糖肽的全面信息,Wiesner等[12]指出, 電子轉移解離(Electron transfer dissociation, ETD)碎裂模式在蛋白質翻譯后修飾研究中, 可以補充CID的不足而發(fā)揮重要作用,高能誘導解離(High energy collisional dissociation, HCD)可以提供更為豐富的低分子段碎片離子信息。多種碎裂方式聯(lián)合的方法在蛋白質組學中也已經(jīng)得到有效應用[13],多種碎裂方式聯(lián)合應用的方式可以為完整糖肽研究提供借鑒。

    本研究以完整糖肽作為檢測對象,制作了HILIC富集裝置,并聯(lián)合CID, HCD, ETD等多種串聯(lián)質譜碎裂方式,在解析糖鏈結構的同時,獲取肽段序列以及糖基化位點信息,從而實現(xiàn)糖蛋白結構的全面解析。

    2實驗部分

    2.1儀器、試劑與材料

    基質輔助激光解吸附電離飛行時間串聯(lián)質譜儀 (UltrafleXtremeMALDITOF/TOFMS, 德國 Bruker Daltonics公司); 電噴霧電離線性離子阱靜電場軌道阱質譜儀(ESILTQOrbitrapXL, 美國Thermo Fisher 公司);離心機、冷凍干燥離心機(美國Thermo Fisher 公司);HILIC 小柱(自制,親水相互作用填料為博納艾杰爾科技產(chǎn)品)。

    牛胎球蛋白(Fetuin)、核糖核酸酶B (RNase B)、2,5二羥基苯甲酸(DHB)、乙腈(美國Sigma公司);肽N糖苷酶F (PNGase F, NEB公司); 胰酶Trypsin(測序級, 美國Promega公司); 二硫蘇糖醇(DTT, 美國GE公司),碘乙酰胺(IAA, 比利時Acros公司),三氟乙酸(TFA)、甲酸(美國Fluka公司); 其它試劑均為國產(chǎn)分析純,實驗用水為MilliQ制備的超純水。

    2.2實驗方法

    2.2.1糖蛋白酶解取適量牛胎球蛋白或核糖核酸酶B蛋白,溶解于50 mmol/L NH4HCO3。加入適量DTT,使終濃度為10 mmol/L,56 ℃水浴1 h。加入IAA,使其終濃度為40 mmol/L,暗處反應30 min。 加入終濃度為10 mmol/L DTT封閉過量的IAA。按質量比1∶50加入胰酶進行酶切,37 ℃反應過夜。反應溶液置于95 ℃水浴10 min,滅活胰酶,終止酶解反應。

    2.2.2HILIC小柱富集完整糖肽本實驗使用由移液槍頭自制的HILIC小柱富集純化蛋白酶切混合物中的糖肽。首先,用80%乙腈,1%FA,沖洗活化小柱,然后,濃縮的酶切混合物,溶于50 μL 80%乙腈,1%FA溶液,上樣于HILIC小柱。再用100 μL 80%乙腈,1% FA溶液進行脫鹽,重復3次。最后用5%乙腈,1%FA溶液100 μL洗脫,收集糖肽。洗脫溶液用冷凍干燥離心機旋干,

    Symbolm@@ 20 ℃保存待用。

    2.2.3MALDITOF/TOFMS分析條件肽段或富集后的糖肽與DHB(2,5二羥基苯甲酸)基質1∶1混合點靶。采用正離子反射模式,離子源電壓20 kV,脈沖離子提取電壓18.8 kV,離子提取延時時間110 ns,激光頻率2000 Hz,激光能量50%,每張譜圖共采集1500個激光點,校準相對誤差≤5 ppm。分析質譜圖譜的軟件為FlexAnalysis 3.4。

    2.2.4ESILTQOrbitrapXL分析條件HILIC小柱富集純化得到的完整糖肽樣品,溶解于50%乙腈0.1%甲酸溶液中,用納升級電噴霧離子源直接進樣,采用LTQOrbitrapXL質譜儀,正離子模式下掃描。采用碰撞誘導解離(CID);高能誘導解離(HCD);電子轉移解離(ETD)等不同的碎裂方式進行碎裂,然后由Orbitrap進行檢測。

    3結果與討論

    3.1親水相互作用色譜富集完整糖肽

    3.1.1HILIC富集糖肽方法考察本研究采用牛胎球蛋白優(yōu)化HILIC小柱富集步驟。牛胎球蛋白由Trypsin酶切后,經(jīng)PNGase F處理去除糖肽上的糖鏈,未經(jīng)富集的Fetuin蛋白酶切產(chǎn)物如圖1a所示。PNGase F去除糖鏈后,消除了糖鏈不均一性對質譜的影響,但由于樣品體系的復雜性和肽段性質的差異,去糖后的糖肽在蛋白的總酶切肽段中的相對信號依然較弱。非糖基化肽段形成的分子離子峰1474.84對其它肽段產(chǎn)生了明顯抑制(圖1a)。例如,去糖后N99位的肽段[M+H]+ m/z 3672.7519,及N156位的肽段[M+H]+ m/z 1741.8247,在譜圖中僅為依稀可見的兩個小峰,而N176位的肽段[M+H]+ m/z 3017.5538甚至難以在譜圖中顯現(xiàn)。

    基于糖肽中糖鏈部分的親水性,以HILIC填料制作的富集小柱可以用于富集并分離樣品中的完整糖肽。蛋白質酶切混合物在高有機相溶液中上樣,糖肽借助其糖鏈部分富含的羥基等親水基團而保留在填料表面的水化層中,而疏水性較強的非糖基化肽段在流動相中分配系數(shù)更大而不在小柱上保留。繼續(xù)用高有機相溶液充分清洗材料上的非特異性吸附后,由高水相溶液洗脫并收集糖肽。這種基于分配機制分離的色譜方法,選擇合適有機溶劑含量的流動相,可以減少材料的非特異性吸附,提高富集效率。圖1b 采用20%乙腈1%甲酸溶液洗脫糖肽,圖1c 采用5%乙腈1%甲酸溶液洗脫糖肽,由PNGase F處理富集后產(chǎn)物,經(jīng)MALDITOF質譜檢測。圖中可見,兩者都可以有效的富集Fetuin的3個N糖基化肽段。但在20%乙腈洗脫時, m/z 1500~2500區(qū)域內(nèi)有較多非糖肽的雜峰,而在5%乙腈洗脫時,該區(qū)域中非特異性吸附引入的干擾明顯減少。結果表明,采用5%乙腈1%甲酸溶液洗脫糖肽可以進一步去除非糖肽的干擾,獲得更好的糖肽富集效果。

    采用移液器槍頭作為HILIC填料的載體,可以根據(jù)目標樣品的多少自由選擇合適量的HILIC填料。合適的填料與樣品比例,可以保證較好的富集效果,減少吸附損失的影響,也可以防止樣品過載。固定填料的用量,依次提高蛋白質的上樣量,即選取樣品與填料質量比為1∶1000,1∶500,1∶50,1∶10時對Fetuin蛋白的酶切產(chǎn)物進行富集。對在洗脫組分和上樣流出組分的糖肽信號進行分析,以3個糖肽中信號強度最高的N156位糖肽的去除糖鏈后肽段[M+H]+ m/z 1741.8247(序列為LCPDCPLLAPLNDSR)的相對強度作為參照,結果如圖2所示。在樣品與填料質量比為1∶10,結合組分和流出組分中的糖肽信號都最高,[TS(][HT5”SS]圖2不同HILIC填料與糖蛋白樣品的比例對富集效果的影響

    Fig.2Relative intensity of glycopeptides under different reaction ratio between glycoprotein and HILIC material

    1. 洗脫組分(Elution); 2. 流出組分(Flow through)。[HT5][TS)]因此以該條件下的糖肽信號為100%,分別計算其它條件下結合組分和流出組分中的糖肽相對強度。當選取樣品與填料質量比為1∶1000和1∶500時,雖然流出組分中未結合的糖肽比例低于20%,但洗脫組分中的糖肽信號也小于40%。當樣品與填料質量比為1∶50時,結合組分中糖肽得到有效的富集,而流出組分中糖肽信號仍低于20%。樣品與填料比例為1∶10時,上樣流出組分中的糖肽相對信號大幅增加,表明此時糖肽已經(jīng)過載。因此,在制作HILIC小柱時,采用樣品與填料質量比為1∶50時富集效果顯著,并能得到較好的回收率。

    3.1.2RNase B完整糖肽制備與純化RNase B經(jīng)過Trypsin酶切,在DHB基質輔助下,得到糖肽和肽段混合物的一級質譜圖,如圖3a所示。由于糖基化的微不均一性,核糖核苷酶B的同一糖基化位點含有5個不同糖鏈長度的高甘露糖(Mannose, Man),即在化學計量水平,一個肽段的豐度被分散到5個糖肽上。對于相對含量較低的糖型,受到其它肽段的干擾更為嚴重,而不利于質譜的選擇與檢測。經(jīng)過HILIC小柱富集后,酶切產(chǎn)物中的非糖基化肽段被有效的去除,僅留下5個清晰的糖肽(圖3b),為肽段序列SRNLTK上分別連接Man5,Man6,Man7,Man8,Man9等不同長度的高甘露糖糖鏈。

    3.2多重碎裂方式互補,全面解析完整糖肽

    3.2.1完整糖肽在經(jīng)典CID模式下的碎裂碰撞誘導解離(CID)是生物質譜中肽段序列分析最為常用的碎裂模式,肽段活化碰撞后主要產(chǎn)生b、y系碎片離子而得以解析序列。但糖基化修飾的糖鏈結構分子量較大,在CID的能量碰撞下,糖肽不能充分碎裂。以肽段序列SRNLTK上連接Man5的糖肽為例,其在電噴霧離子源中雙電荷離子為[M+2H]2+ m/z 967.93。由于糖苷鍵穩(wěn)定性比酰胺鍵弱,在CID條件下優(yōu)先斷裂,而形成糖肽上逐一丟失單糖的二級碎裂圖譜。改變CID的碎裂能量,從10%至50%。當CID 能量為20%,糖肽母離子開始碎裂,其最強的子離子占母離子相對豐度的70%,當CID能量為30%時, 母離子全部碎裂(圖4)。繼續(xù)提高能量至35%,40%,45%和50%, 其碎裂情況基本不變。因此,CID的碎裂譜圖上難以得到肽段序列的信息,不能全面闡明完整糖肽的結構。

    [TS(][HT5”SS]圖4母離子為[M+2H]2+ m/z 967.93糖肽的CID碎裂二級質譜圖(方塊為N乙酰葡萄糖胺,圓圈為甘露糖)

    Fig.4MS/MS spectrum of glycopeptide by collisioninduced dissociation (CID) fragmentation, the precursor ion [M+2H]2+ m/z 967.93 (squares, Nacetylhexoseamine, HexNAc; circles, Hexose, Hex)[HT5][TS)]

    3.2.2完整糖肽在HCD模式下碎裂能量的優(yōu)化在HCD碰撞模式下,累積后的母離子將被注入HCD碰撞池中與中性氮氣分子碰撞,碎裂后經(jīng)CTrap送入Orbitrap檢測。此處仍然采用肽段序列SRNLTK上連接Man5的糖肽,m/z 967.93為檢測對象。依次提高HCD的碰撞能量,在20%能量下,糖肽的碎裂基本與CID 30%能量碎裂時一致。當HCD能量為25%時,糖肽的譜圖如圖5所示。在低分子量區(qū)域,產(chǎn)生系列糖的特征離子,如m/z 204(HexNAc+H)+,m/z 366(HexNAc+Hex+H)+,以及氧鎓離子m/z 204(HexNAc+H)+繼續(xù)碎裂而產(chǎn)生的碎片離子,例如m/z 126, 138, 168和186等。由于HCD模式下不存在離子阱質譜儀CID模式下的低質量端1/3質量丟失,使得上述糖碎片離子得以檢測。在中高分子量區(qū)域,HCD譜圖得到一系列的逐一丟失單糖的Y系列碎片離子,各離子有1電荷與雙電荷兩種狀態(tài),故形成兩組m/z不同的離子峰。其中Y1(肽段+HexNAc+H)+離子峰m/z 921.45強度高,因此Y1離子和糖碎片氧鎓離子是顯著的糖肽離子特征峰。

    [TS(][HT5”SS]圖5母離子為[M+2H]2+ m/z 967.93糖肽的HCD碎裂二級質譜圖(方塊為N乙酰葡萄,圓圈為甘露糖)。插圖顯示低質量端糖碎片離子

    Fig.5MS/MS spectrum of glycopeptide by high energy collisional dissociation (HCD) fragmentation, the precursor ion [M+2H]2+ m/z 967.93 ( squares, Nacetylhexoseamine, HexNAc; circles, Hexose, Hex). Insert view showed the fragment ions of glycans in the low mass region[HT5][TS)]

    由圖6可見,不同的HCD碰撞能量下,糖肽的特征離子相對豐度各有不同。隨著HCD能量的增加,糖的特征碎片離子信號不斷升高,其中可以繼續(xù)碎裂的m/z 204與366離子在能量大于25%時開始降低。同時,雙電荷狀態(tài)下的Y系列離子主要在20%~25%的中高能量下信號較高,隨著能量的進一步加強,雙電荷離子完全碎裂。1電荷的Y碎片離子系列,在HCD能量25%時達到高峰,但并不隨能量的提高而繼續(xù)增強。故采用HCD能量為25%,對糖肽進行碰撞解離,其二級譜圖可以得到最為充分的信息。 [TS(][HT5”SS]圖6不同HCD碎裂能量下,糖肽二級譜圖中碎片離子的相對豐度: (a) 糖的特征離子;(b)雙電荷的Y系列離子;(c)1電荷的Y系列離子

    Fig.6Relative intensity of glycopeptides′ fragment ions in different HCD energy (a) carbohydratespecific ions; (b) a series of Y ions doublelycharged; (c) a series of Y ions singlelycharged[HT5][TS)]

    3.2.3完整糖肽在ETD碎裂中肽段序列分析ETD碎裂方式是將電子從一個活潑的陰離子基團轉移到帶正電荷的肽段上,從而誘發(fā)肽段序列碎裂產(chǎn)生c、z離子。由于ETD的軟碎裂模式,翻譯后修飾的基團常得以保留,因此有利于準確識別修飾位點。如圖7所示,m/z 967.93的Man5糖肽在ETD譜圖中,產(chǎn)生肽段骨架結構的碎片離子,從C3~C5及Z4~Z6兩組離子中,得到該糖肽的肽段序列為SRNLTK。從C2~C3及Z3~Z4之間,有大范圍的質量跳躍,可以清晰指示糖基化位點。

    綜上所述,CID主要產(chǎn)生糖苷鍵斷裂的碎片,為糖鏈的結構組成分析提供了線索;HCD在低分子量區(qū)域提供了糖鏈的特征離子信息,并產(chǎn)生明確的糖肽Y1特征離子,同時也產(chǎn)生部分糖苷鍵斷裂的碎片,為糖鏈結構信息提供參考;ETD保留了完整的修飾基團而產(chǎn)生肽段骨架的斷裂,可以提供有效的肽段序列信息。因此,聯(lián)合CID、HCD、ETD等多種碎裂方式,即可得到糖鏈結構、糖基化位點和肽段序列等糖蛋白質結構的全面信息。

    莫言臺灣范文第4篇

    一樣的日子,不一樣的精氣神,大師就是大師

    北京作家李洱說莫言深受儒家思想浸染,謙和忍耐貫徹在莫言的待人接物里。出租車司機討厭去擁堵的地方,遠又拉不著回頭客的地方。那臉子掛的別提多難看了!莫言的女兒家住得很偏遠,恰恰屬于北京司機痛恨的區(qū)域。莫言為此很忐忑,如坐針氈,一路上都覺得嗓子眼里神經(jīng)性地很癢,又不想大聲咳嗽;聊天也不好,怕被人家噎著。下車多給些錢的想法,似乎有瞧不起車船店腳衙的嫌疑。后來,莫言每次打車前就去搜羅一盒好煙,多是中華之類的,上車先給司機獻上,心說只要你別一路臭著一張臉,然后稍稍坦然了些。當然,這還是文人思維,還不直接多給30塊錢,保證司機和顏悅色的。

    莫言目前的穩(wěn)定收入來源是擔任中國藝術研究院文學院院長的工資。他創(chuàng)作一部作品常需歷時數(shù)年,而作品又面臨著嚴重的盜版侵權。為了照顧莫言和女兒管笑笑,愛人杜勤蘭在北京一直沒有出去工作,過去女兒管笑笑上學,90歲的老父親也需要贍養(yǎng),全靠莫言一個人的收入。

    雖然收入并不豐厚,但莫言卻仍然盡量為老家平安村作些貢獻。村口的一塊功德碑上,刻有2009年為村里修路的捐款者名單,莫言的名字列第一個,捐獻了3萬元。

    “多到長安街上走,少到胡同兒里面串”,這是莫言在北京生活近30年后總結出的一套生活經(jīng)驗。莫言把當兵時爸爸的家訓繼承得忠實啊,連這番訴苦和委屈都沒敢在北京傾吐,而是隔著千山萬水、在一次香港的書展上,身邊是彰顯個性的張悅然和永遠高調(diào)的陳冠中,估計氣場也比較有感染力。

    其實在新作《蛙》里,莫言就曾經(jīng)寫到過一段在京生活多年的主人公在胡同里被本地人“欺負”的場景。張悅然詢問故事的真?zhèn)危蕴钩芯褪前l(fā)生在自己身上的一段經(jīng)歷。他說這是北京千余年來的帝王文化,外地人就好像《沙家浜》里的阿慶嫂,需要借貴方一塊寶地謀生。莫言總覺得,北京越住越陌生,故鄉(xiāng)反而越來越近。但其實,故鄉(xiāng)也只是心里的,那個不再長高粱的高密,莫言早就回不去了。

    愛吃煎餅卷大蔥 說話不多雷倒人

    鄰居曾經(jīng)問杜勤蘭,莫言老師那么大的作家,掙那么多錢,怎么看你很少買肉,每次都買一大堆蔬菜?杜勤蘭說,其實家里改善生活就是包一頓餃子。餃子,是莫言幾十年來最喜歡的美食。

    一個大作家,身居京城文化高層,國宴大席都司空見慣,海鮮西餐熟視無睹,最好的那口是烙餅卷大蔥和大醬,到了飯館,只要有這個,肯定不選別的。朋友說,別看莫言20多歲就離開故鄉(xiāng),跟我們一塊吃飯時,先挑那些做煎餅的餐館。每逢有人去北京出差,總會給莫言帶上一些煎餅,讓莫言打打“饞蟲”。

    守著北京這個國際文化大都市,自己的本子被人藝和空政都搬上舞臺了,但話劇歌劇芭蕾音樂劇,莫言一個都不動心,最上心的娛樂消遣就是茂腔。

    “啥時咱們見見面,抽煙喝茶聽茂腔(貓腔)。”這是莫言打油詩《答老鄉(xiāng)》中的兩句。另一首是:“當兵兩年還故鄉(xiāng),車站廣場聽茂腔。此曲唯在高密有,使我潸然淚兩行。”

    山東文學圈的朋友聚會,大伙都讓莫言唱幾句茂腔戲。沒想到沉默寡言的莫言竟然答應了,開口就唱,唱完還很在意地問大家好聽不好聽。

    莫言具有山東人的熱心和慷慨。研究生齊林泉分配到北京,莫言對他關愛備至,每到周末包水餃的時候,都要約到家里;另外一個研究生趙學美的戀人在北京工作,莫言千方百計幫助在京找工作。

    早些年,兩岸還沒有實現(xiàn)“三通”,為了能讓朋友順利成行,莫言把自己所有的書稿都抵押給了臺灣出版商,不惜做政治和經(jīng)濟的雙重擔保。

    莫言生活中不是一個木訥的人。剛出道時,莫言作品研討會非常熱鬧,莫言卻默默無言。23年之后,莫言獲得中國長篇小說最高獎——茅盾文學獎,也沒說太多話。有次徐曉斌向他轉達了翻譯葛浩文從美國傳過來的話,他竟然毫無表情。等飯吃完了,他才微笑著說了一聲“謝謝你”,把徐曉斌雷倒。

    然而時隔15年之后——莫言在澳大利亞主持會議,將東西方文化交融一處,引經(jīng)據(jù)典妙趣橫生,不斷引起笑聲與掌聲,再次驚到徐曉斌。原來,這15年,莫言在表達方式上扮演了一部《國王的演講》。

    徐坤說莫言:“第一,他不說假話;第二,他特別會說話,談吐機智,幽默風趣,縱橫捭闔,舉重若輕,非常有智慧,不是一般的修煉,是洞若觀火、成仙成魔的道行。他兩年前在法蘭克福書展的演講很有代表性,聽了很長學問。”

    莫言雖然話不多,但寥寥數(shù)語就能帶來快樂。奧地利的研究者去看他,和父母一塊迎接的莫言說:“非常歡迎!我父母除了在日本鬼子進村的時候見過外國人,還沒見過別的外國人呢。”

    莫言臺灣范文第5篇

    莫言用“魔幻般的現(xiàn)實主義”作品打動了世界。他的作品廣受國內(nèi)外廣大讀者喜愛。莫言的獲獎,表明世界文壇對中國文學的肯定以及對中國作家的深切關注,表明中國文學所具有的世界意義。

    他的魔幻想象力通行世界

    “將魔幻現(xiàn)實主義與民間故事、歷史與當代社會融合在一起。”對于莫言小說的特點,諾獎評審委員會的頒獎詞描述得很準確。莫言的想象力極其豐富,作品的傳奇色彩異常濃郁,對拉美文學魔幻手法的借鑒與運用,使其作品具有相當?shù)臍v史感,對歷史的評價也有其獨特的視角,這是他作品的鮮明特點。

    上世紀80年代,世界上各種現(xiàn)當代文學流派涌進中國,給中國文壇與當代文學帶來了不少影響。福克納和馬爾克斯成了莫言在小說技法上開竅的兩位重要導師,開闊了莫言的視野和魔幻想象力。他筆下的高密東北鄉(xiāng)與福克納筆下的約克納帕塔法縣和馬爾克斯筆下的馬孔多小鎮(zhèn)一樣,充滿了想象力和寓意。但是“到了1987年我已經(jīng)意識到必須‘逃離’福克納和馬爾克斯他們,否則就像挨著兩座火山,會把自己給灼燒了。”莫言獲知得獎后在接受央視記者采訪時這樣回憶。他是一位既能接納、借鑒外國先進創(chuàng)作技法,又能扎根本土、為我所用的中國優(yōu)秀作家。

    臺灣知名作家龍應臺說:“莫言的想象力,既泥土又狂野,既荒誕又現(xiàn)實。他多有魅力,一開口就迷倒所有人。莫言的魔幻寫實和想象力,比較容易激發(fā)外國人的想象。”從他的成名作《透明的紅蘿卜》發(fā)表后震驚文壇起,莫言作品所提供的中國經(jīng)驗、詭譎的想象力和旺盛的創(chuàng)造力,以及充滿意象、詩意和幽默的獨特敘事,都令人贊嘆。

    莫言此次獲獎得益于他的作品已經(jīng)被大量翻譯成世界各種語言,不僅僅是英語,還包括很多其他語種,莫言的作品被譯成20多種外文、100多種版本,在許多國家和地區(qū)發(fā)行,在西方傳播比較廣泛。以諾貝爾文學獎評獎機構所在地瑞典來說,莫言就有《紅高粱家族》《天堂蒜薹之歌》《生死疲勞》三部代表作被西方漢學家陳安娜用瑞典語翻譯出版。對于外界對她的推崇,陳安娜非常謙虛,她說:“謝謝大家!請別忘記,莫言有很多譯者,文學院也看了不同語言的版本:英文、法文、德文等。”就翻譯水平來說,莫言的作品翻譯水平非常高。

    越是民族的東西越是世界的

    莫言的想象從來不脫離現(xiàn)實。獲得茅盾文學獎的《蛙》通過一個鄉(xiāng)村婦科醫(yī)生來反思計劃生育、代孕生子等社會問題。在莫言老家山東高密東北鄉(xiāng),“姑姑”在過去幾十年里一直是當?shù)丶矣鲬魰缘慕由拧@便成了《蛙》的主角;《檀香刑》通過描寫暴力、酷刑和苦難,來警醒世人抑制欲望和邪惡。

    “我的故鄉(xiāng)和我的文學是密切相關的。”莫言說,“高密有泥塑、剪紙、撲灰年畫、茂腔等民間藝術。民間藝術、民間文化伴隨著我成長。我從小耳濡目染這些文化元素,當我拿起筆來進行文學創(chuàng)作的時候,這些民間文化元素就不可避免地進入了我的小說,也影響甚至決定了我的作品的藝術風格。”

    莫言出生于山東高密。他一系列鄉(xiāng)土作品充滿“懷鄉(xiāng)”的復雜情感,他因此被稱為“尋根文學”作家。《紅高粱家族》被張藝謀改編為電影獲得國際大獎;長篇小說《蛙》2011年獲第八屆茅盾文學獎。從《白狗秋千架》里把老家變成“高密東北鄉(xiāng)”開始,《秋水》里,他再度觸摸這片土地。至此,《紅高粱》《豐乳肥臀》《蛙》,他的幾乎所有優(yōu)秀作品,都在這片充滿想象力的土地上展開敘事,并有意識地向歷史縱深挖掘,向廣袤的中國鄉(xiāng)村延伸。今年57歲的莫言1981年發(fā)表處女作短篇小說《春夜雨霏霏》。三十年來,他摒棄浮躁與誘惑,潛心文學創(chuàng)作,以鄉(xiāng)土中國為原型塑造出了一個充滿生命張力、寓言式的而又蘊涵深厚歷史感的世界。

    《檀香刑》曾獲第一屆鼎鈞雙年文學獎。獲獎詞寫道:“莫言的創(chuàng)作一直保持了旺盛的生命力。究其根本,應該歸之于莫言的感覺方式有著深厚的地域和民間淵源。”他的《四十一炮》獲第二屆華語文學傳媒大獎、年度杰出成就獎,頒獎詞中說:“他從故鄉(xiāng)的原始經(jīng)驗出發(fā),抵達的是中國人精神世界的隱秘腹地。他的筆下的歡樂和痛苦,說出的是他對民間中國的基本關懷,對大地和故土的深情感念。他的文學性格既天真又滄桑;他書寫的事物既素樸又絢麗;他身上有壓抑不住的狂歡精神,也有進入本土生活的堅定決心。這些品質都見證了他的復雜和廣闊。”

    莫言是用世界的眼光,講中國的故事。他講述的中國故事,洋溢著渾厚的人類情懷和濃厚的鄉(xiāng)土氣息。

    正是那種濃烈的鄉(xiāng)土氣息讓西方讀者感興趣。莫言“民間創(chuàng)作”深厚的地域和民間淵源,加上運用大量的現(xiàn)代主義文學技巧,使他的作品元氣充沛,想象力驚人。他對中國的歷史與現(xiàn)實的強烈關懷和深刻挖掘,他的作品的鄉(xiāng)土性、豐富性;文學藝術上的魅力很完整地呈現(xiàn)了出來,于是打動了評委們,也打動了西方文學同行。這是他獨有的成就。由此也充分說明越是民族的東西越是世界的。

    外媒熱評莫言文學成就及其作品價值

    對于莫言問鼎諾貝爾文學獎,外媒十分關注,不僅紛紛在重要位置予以報道,更對莫言作品作出高度評價,稱其獲獎為中國文學融入世界創(chuàng)造了良好契機。

    據(jù)英國《金融時報》報道,中國作家莫言憑借融合“民間故事、歷史和當代”的“魔幻現(xiàn)實主義”獲得2012年諾貝爾文學獎。莫言對農(nóng)民生活的描寫備受好評,他在西方最出名的作品是《紅高粱》。報道引述瑞典皇家科學院常務秘書彼得·英格倫的話稱,莫言的作品出色地審視了中國社會,是“福克納、拉伯雷與狄更斯的混合體”。

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