前言:想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎?我們特意為您整理了5篇土壤檢測論文范文,相信會為您的寫作帶來幫助,發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。
關鍵詞:土壤,菠菜,鉛的含量,自然對數(shù),正態(tài)分布,相關性
1.實驗部分1.1儀器與試劑WFX-110原子吸收分光光度計(北京瑞利分析儀器公司)
AE240型電子分析天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)
光纖壓力密閉微波消解器MK-Ⅲ型(上海新拓微波溶樣技術有限公司)
MILII-Q超純水凈水系統(tǒng)(Miillipore.Lit.Co.)
鉛標:500mg/L 國家標準物質(zhì)GBW(E)080362
所使用的試劑均為優(yōu)級純試劑,實驗用水為超純水。
1.2實驗部分1.2.1試樣材料①土樣來源:源自漳州市蔬菜傳統(tǒng)供應基地詩埔村菜地,約12畝地,常年種植當季蔬菜,土壤類型是水稻土,種植期5年以上。
②采集方法:以20m×20m將菜地劃分19個網(wǎng)格。詳見圖1.2-1.。采集每個網(wǎng)格內(nèi)的土壤樣品(樣本甲)以及相應位置的菠菜樣品(樣本乙)。
土樣采集耕作層的深度為離地面15-20cm,采集量為2~3kg/份;蔬菜采集當季生長期的菠菜,除去根系取可食用部分的莖和葉,采集量為1kg。
論文摘 要:現(xiàn)代信息技術在水文領域中的應用不斷完善和發(fā)展,特別是在最近幾年之中,ANN技術、3S技術與水文模型的整合研究的發(fā)展,有助于開創(chuàng)水文研究的新領域。本文主要通過對RS、ANN、GIS、GPS等技術的研究,從防汛抗旱、水文預報、保護水環(huán)境生態(tài)、水土保持這四個方面,闡述了現(xiàn)代信息技術在水文領域的應用
RS技術在水文領域中的應用分析
遙感技術,即RS技術廣泛應用于對旱情的檢測與評估、檢測水質(zhì)、監(jiān)測和評價土壤侵蝕和洪澇災害等水文領域之中,取得了明顯的經(jīng)濟效益。在洪澇災害之中經(jīng)常會使用遙感技術。緊急救災、災后重建和快速反應是遙感技術應用集中的主要方面。例如,我國早在80年代就利用了MSS數(shù)據(jù)檢測到了三江平原的洪澇災害。之后民政局、中科院和水利部門都進行了相關的研究工作,在實踐之中取得了顯著的成效。遙感技術可以大幅度的減少洪澇災害的損失,尤其是在災后重建等當面,與其他普通手段相比具有全面性、客觀性和快捷性的優(yōu)勢。遙感技術評估在災害的監(jiān)測評估方面也有了顯著的發(fā)展。通過對土壤表面發(fā)射的電磁能量來測量估計土壤的濕度,再加上實測數(shù)據(jù)的支持,可以實現(xiàn)對旱情的遙感監(jiān)測。同時還可以通過對作物的長勢、地表溫度的監(jiān)測來監(jiān)測旱情。通過了解不同地域的具體情況,建立針對它們的具體模型。我國目前建立在遙感技術基礎之上的監(jiān)測模型包括熱慣量模型、作物缺水指數(shù)模型、植被指數(shù)模型和植被地表溫度空間模型、氣象模型、水文模型和微波模型等。使用遙感技術可以更快速和更低廉的獲取大面積土壤的水分信息。因為監(jiān)測模型的簡繁程度有很大差異,所以遙感技術的使用范圍和使用精度也有不同。我國目前已經(jīng)建立了初步的旱情遙感技術監(jiān)測體系,在一些試點地區(qū)獲得了顯著的成效。遙感技術在水質(zhì)監(jiān)測之中也有很大的作用。運用遙感監(jiān)測技術,可以動態(tài)的監(jiān)測地表水質(zhì)在時間和空間上參數(shù)的變化情況,具體表現(xiàn)在對濕地的評價、和測定水質(zhì)參數(shù)等方面。遙感技術在水質(zhì)監(jiān)測方面的應用已經(jīng)開始在實踐生產(chǎn)之中使用,隨著它在水質(zhì)監(jiān)測領域的地位更加重要,它的發(fā)展也不斷完善。
GPS技術在水文領域中的應用分析
全球衛(wèi)星定位系統(tǒng),即GPS技術,具有自動化、高效率、精確度高、全天候的優(yōu)點,成功應用于工程測量、航空攝影、資源勘測、地球動力學、大地測量、水文領域之中,取得巨大的社會效益和經(jīng)濟效益。水利信息與空間地理位置有很大的關系,GPS可以更準確的獲取水利信息的空間位置,可以運用在減災防汛和水下地形測量等方面。使用全球衛(wèi)星定位技術,可以及時準確的定位災害的發(fā)生地點,尤其是在使用了無線通話功能之后,實現(xiàn)了雙向的通話功能,使指揮中心和災害現(xiàn)場能夠自由及時的對象,方便二者進行溝通,對緊急情況做出應急反應。以往在汛期來臨時,在大堤上排查險情,在發(fā)現(xiàn)了險情隱患之后,通過對講機向指揮部門匯報,耽誤了搶險時間,而且無法準確的描述出險情發(fā)生的位置。一旦報警系統(tǒng)上運用了GPS技術,能夠在第一時間將災害的發(fā)生地點和災害類別傳送到指揮中心,可以對險情做出有效的反應。在運送搶險物資的車輛中,安裝GPS監(jiān)控系統(tǒng),編碼后的汽車可以將其定位信息傳送到指揮中心,指揮中心在接受到定位信號之后,可以將移動的船只和車輛的位置在地圖上動態(tài)的顯示出來。再配合電子地圖,例如公路交通圖、水系分配圖、居民區(qū)分布圖、物資倉庫分布圖等,利用網(wǎng)絡的分析功能,可以將搶險物資以更快捷的方式送入受災群眾手中。而水下地形的測量在水庫、港口、碼頭和橋梁的建設之中起著很大的作用,尤其是在減災防洪的過程之中,會帶來巨大的社會效益。
3 GIS技術在水文領域中的應用分析
地理信息系統(tǒng),即GIS,是在計算機軟件和硬件系統(tǒng)的支持下的特定的空間信息系統(tǒng),可以采集地球表層的相關地理分布數(shù)據(jù),同時對數(shù)據(jù)進行儲存、運算、分析、管理、描述和顯示。我國目前的地理信息系統(tǒng)已經(jīng)廣泛的使用在減災防汛、水土保持、水環(huán)境等水文領域。在減災防汛的領域之中,GIS技術可以預測預報城市的積水和退水狀況、管理更新現(xiàn)有的排水設施情況、對排水設施進行設計和規(guī)劃。規(guī)劃城市綠地的面積和位置。分析暴雨的空間特征、對積水街道和暴雨的分布進行可視化的顯示、儲存具有分辨率高、層次多、更新頻率快的數(shù)據(jù),并對數(shù)據(jù)進行維護和管理。地理信息系統(tǒng)在再請評估方面也有很大的作用,例如管理基礎背景數(shù)據(jù)、查詢空間和屬性數(shù)據(jù)、對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計、顯示和檢索。GIS技術在水土保持之中的應用十分全面。主要包括判斷是否發(fā)生土壤侵蝕、土壤侵蝕的程度劃分、計算土壤侵蝕量、評價水土保持的效益、泥沙輸移的狀況、預測和模擬土壤的侵蝕過程等。在水土保持之中往往直接使用GIS作為建立模型的平臺,這是與GIS在其他領域的使用中最大的區(qū)別。遙感技術、地理信息技術和全球衛(wèi)星定位系統(tǒng),即3S技術的集成使用為空間信息的管理、分析、應用、更新、獲取和存儲等方面提供了技術支撐。使用RS技術采集圖像信息,使用GPS技術提供主要的位置信息,最后使用GIS使用一些技術手段,例如分析應用和圖像處理等。將這三個技術緊密的結(jié)合起來,可以提供精確的數(shù)據(jù)資料的文本資料,可以通過動態(tài)電子地圖的使用查看不同水文領域的信息,同時可以借助人工神經(jīng)網(wǎng)絡的實施,對洪峰流量、降水等水文要素進行科學、合理的分析,為減災防汛提供科學的依據(jù)。
4 ANN技術在水文領域中的應用分析
ANN技術,即人工神經(jīng)網(wǎng)絡技術,是使用數(shù)學方法對自然神經(jīng)或人腦進行模擬和抽象,是一種模仿人腦結(jié)構(gòu)的信息處理系統(tǒng)。在水文領域,ANN技術主要可以進行洪水的預報和降雨流量預報等。人工神經(jīng)網(wǎng)絡技術具有適應能力強、計算速度快和自主學習能力強的功能。首先對輸入條件和輸出條件進行分析。輸入條件包括降雨歷時、降雨量、降雨過程、河道基流等。輸出條件包括出口段面的流量信息。輸入層、輸出層和隱層這三個部分一起構(gòu)成了降雨徑流的預報模型。防洪的非工程性措施是洪水預報,做出及時的洪水預報可以幫助相關部門制定準確可行的防洪決策。ANN技術在水文預報方面的作用主要通過實測資料,使用神經(jīng)元的模擬關系,模擬影響洪水的其他因素和洪水之間的關系。
5 結(jié)語
總之,現(xiàn)代化的信息技術支持可以促進水文信息化建設,本文講述的RS技術、GIS技術、GPS技術和ANN技術都在水文領域之中得到了廣泛的使用。隨著社會主義現(xiàn)代化進程的不斷加快,國家過度重視信息的基礎設施建設,使水文技術和現(xiàn)代信息技術共同發(fā)展。
參考資料:
[1] 陳潔.遙感和水問題 [M].北京:人民水利水電出版社,2005,40,47.
關鍵詞:表土;表土剝離;技術;復墾
中圖分類號:U412.1+4 文獻標識碼:A 文章編號:1674-0432(2010)-11-0238-1
土地是關系到國計民生的重要戰(zhàn)略資源,耕地是廣大農(nóng)民賴以生存的基礎[1]。我國處于工業(yè)化和城市化快速發(fā)展時期,在經(jīng)濟快速發(fā)展、城市化不斷推進的這一歷史時期,占用耕地數(shù)量繼續(xù)加大,已不可避免。在新增建設用地中占用耕地數(shù)量較多,表土浪費問題嚴重。如何從資源可持續(xù)利用的角度,通過表土剝離使寶貴的土壤資源得以循環(huán)利用,已引起社會各界的廣泛關注,并成為改進耕地保護方式、提高耕地保護水平的重大課題。我國又是農(nóng)業(yè)大國和綠色食品大國,對優(yōu)質(zhì)農(nóng)業(yè)資源的依賴性更強。因此要改變過去建設占用耕地的表土處理辦法,率先在糧食主產(chǎn)區(qū),特別是東北黑土區(qū)開展表土剝離技術研究和試點,實行表土剝離。
1 表土剝離的定義
表土剝離(Topsoil stripping)是指將建設占用地或露天開采用地(包括臨時性或永久性用地)所涉及到的適合耕種的表層土壤進行剝離,并用于原地或異地土地復墾、土壤改良、造地及其他用途的剝離、存放、搬運、耕層構(gòu)造與檢測等一系列相關技術的總稱。
這種技術具有諸多優(yōu)點。表土剝離技術能減少土地資源浪費,有效保護地表熟土資源不被流失;減少復墾造地時外調(diào)土產(chǎn)生的額外資金投入,額外費用和時間;保證剝離表土的土壤肥力;保證了作物產(chǎn)量和建設使用土地面積,增效顯著。
2 項目工程表土剝離技術要點
本論文以前郭爾羅斯蒙古族自治縣長山鎮(zhèn)繁榮村高速公路取土場表土剝離工程為背景,項目工程包括7個臨時取土場,總用地面積71.49hm2,其中占用耕地面積27.07hm2,經(jīng)勘查均為優(yōu)質(zhì)耕地,全部實行表土剝離。工程中表土臨時堆放,取土完成后回填恢復耕地。前郭取土場工程實質(zhì)就是將項目區(qū)高程較高的耕地的表層沃土剝離,就近按層次堆放儲存。待取土作業(yè)完成之后,將存放的沃土層回填復墾,恢復耕種。
大規(guī)模土地復墾是一項系統(tǒng)工程,而由于地理位置的不同,每一個取土場的復墾要求又千差萬別。要求首先對每個取土場做出復墾設計,對每個取土場進行地質(zhì)勘查、地形測量。因此,在有關土地管理、環(huán)境保護、水文資源專家的指導下,進行了地點選擇,并依據(jù)保留場地施工前的土壤和景觀資料,確定表土剝離的厚度,設計排水系統(tǒng),堆放和回填剝離的表土與土壤,以及對耕種前土體和土壤進行檢測,從而最終完成取土場復墾設計。
其中,地點選擇時,根據(jù)10年一遇的防洪防澇標準,結(jié)合取土場地形情況,盡量選擇地形較高的取土場以保證取土量,又能較易恢復復墾后的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件,平均挖深6.5m。平地取土場,平均挖深3.5m。表土剝離時,為確保土壤肥力,最大限度地恢復耕種條件,必須確保表土剝離在50cm以上。取土樣時需經(jīng)過一定階段的土壤沉實期,取土深度均為0-20cm和20-40cm。剝離的土層堆放時應覆蓋土工編織物,防止產(chǎn)生揚塵;土體揚撒部分草籽以防水土流失和土壤風化;土體坡腳用沙袋碼放堆置,防止土體滑坡。宜樹則樹、宜草則草、宜藤則藤,適物種植,美化環(huán)境,防止水土流失[2]。取土工程完畢后,按原來層次順序進行剝離土壤的回填,可先粗略平整,再精平,應考慮到土壤的沉降,復墾的土層坡度不應大于2°。
3 耕地質(zhì)量
分別于2010年9月11日和10月22日在前郭縣長山鎮(zhèn)繁榮村取樣,就不同深度(5、6、8是0-20cm,9是在坑內(nèi)400cm處)、不同植被覆蓋情況(5是綠豆,8是玉米,6和9無植被)、不同表土剝離土壤(5、8是原耕地土壤和6、9待處理土壤),在項目區(qū)現(xiàn)場選擇了土壤容重、入滲率、pH值、有機質(zhì)、全氮、速效磷、速效鉀、毛管持水量、總孔隙度、團粒結(jié)構(gòu)等10項指標進行測試,評價耕地質(zhì)量。土壤化驗結(jié)果如下:
表1 土壤化驗結(jié)果
編號 地點 有機質(zhì)(g/kg) 速效磷(mg/kg) 堿解氮(mg/kg) 全氮
(g/kg) 速效鉀(mg/kg) pH 電導(ms/cm)
緯度(N) 經(jīng)度(E)
5 45°16′36″ 124°32′41″ 21.50 30.89 108.51 1.828 161.54 7.98 0.31
6 45°16′41″ 124°32′19″ 16.15 25.05 75.06 1.435 173.65 8.18 0.54
8 45°16′28″ 124°32′37″ 20.50 29.22 100.12 1.687 152.40 7.36 0.13
9 45°16′31″ 124°32′36″ 11.15 25.05 75.06 1.330 173.65 7.90 0.23
根據(jù)土壤化驗結(jié)果,前郭取土場表土符合復墾用土要求,并且有毒重金屬和持久性有機物檢測合格,只要保證有效土層厚度、結(jié)構(gòu),就可以達到耕種要求。
參考文獻
[1] 孫宏斌,馬云龍.公路建設表土利用的幾點措施[J].黑龍江科技,2007,(12):162.
[2] 冉秀炳.礦山剝離、堆浸廢渣場綠化植被的研究[J].黃金,2000,(10):41-44.
關鍵詞:雷電防護,高層建筑,防護手段。
中圖分類號:TU97文獻標識碼: A
正文
一、引言
隨著經(jīng)濟的發(fā)展和城市人口的增多,高層建筑如雨后春筍般拔地而起,遭受雷擊的案例也越來越多。據(jù)不完全統(tǒng)計,進入21世界以來的十幾年間,全國因雷擊造成直接經(jīng)濟損失在百萬元以上的事故就有近400多起,每年因雷電災害造成人員傷亡數(shù)千人。高層建筑在社會中起到很重要的作用,許多商業(yè)寫字樓往往將銀行、公司、酒店等多種功能的場所集中在一起,人員密集,電子通訊設備繁多,電力系統(tǒng)復雜,一旦遭受雷擊將會造成巨大的經(jīng)濟損失。
雷電防護是一種保護建筑物及人身安全、電力系統(tǒng)及其他一些裝置和設施免遭雷電損害的技術措施,也是近年來愈發(fā)重要的一門學科,其保護內(nèi)容涉及建筑物、發(fā)射塔、輸電線路、加油站、航空、軍事等重要領域及工作生活場所。
一、雷擊對高層建筑的常見侵襲途徑
1、 直接雷擊
對一般高層建筑外部來說,所屬建筑物、建筑物天面設備和電力線及傳輸線都有可能遭受直接雷擊,即使在避雷針保護范圍之內(nèi)的設備也有被雷電繞擊的可能。直擊雷的特點是能量大,電力線發(fā)生直接雷擊,容易發(fā)生火花放電,引起火災,同時,雷電流通過電力線進入機房,也可能擊中電源及設備。傳輸線發(fā)生直接雷擊,可能導致線路焦化、短路、致使傳輸中斷。
2、側(cè)擊雷
對于高層建筑來說,不僅屋頂容易遭受直擊雷的雷擊,在滾球半徑以上的側(cè)面,外墻的電線、金屬門窗、外掛空調(diào)機、節(jié)日彩燈和輪廓燈都容易遭受側(cè)擊雷的侵襲,損壞設備、燒毀線路甚至危害人身安全。因此高層建筑要做好相應的側(cè)擊雷防護措施。
3、電磁感應
當雷擊發(fā)生時,將在雷擊點附近產(chǎn)生電磁場。當雷電流沿著高層建筑的引下線和內(nèi)部鋼筋向下泄放時,由于電磁感應原理,整個建筑物會處在一個強大且變化的電磁場中,這個電磁場很容易使正在工作的電子設備產(chǎn)生過電壓或浪涌故障,即使是一些與外界沒有聯(lián)系的系統(tǒng),也可能在雷響過后發(fā)生癱瘓。研究建筑物內(nèi)部的
雷擊電磁脈沖是非常必要的。
4、雷電波侵入
架空高壓輸電線路和金屬管道在進入高層建筑物時,線路管道附近有可能被雷電擊中而產(chǎn)生過電壓和靜電感應,通過供電線路進入設備使設備造成損壞。
5、地電位反擊
地電位反擊是雷電流入地瞬間,由于地電位不同而產(chǎn)生的電位差,沿接地線到達設備的外殼、電力線的中性線以及直流地的基準電位點。
二、防雷設計原則、依據(jù)、標準及規(guī)范
設計原則 :
(1)保障高層建筑內(nèi)的人身安全;
(2)保護高層建筑主體以及各處電子設備不受直擊雷影響和破壞;
( 3)保護高層設備不受側(cè)擊雷的破壞;
(4)盡可能保護建筑內(nèi)設備和電力系統(tǒng)不受雷擊各項效應破壞;
設計依據(jù):
根據(jù)高層的建筑結(jié)構(gòu)、防雷等級、當?shù)啬昶骄妆┤铡歉摺⒔ㄖ牧稀⑼寥离娮杪省⒁约皽y量的數(shù)據(jù)等資料,結(jié)合相關技術指標以及GB50057-94 《建筑物防雷設計規(guī)范》以及其他相關行業(yè)規(guī)范標準等綜合考慮制定。
設計標準、規(guī)范:
GB50057-94 《建筑物防雷設計規(guī)范》 02D502-2 《等電位連接圖集》
GB/T 21431-2008 《建筑物防雷裝置檢測技術規(guī)范》 03D501-4 《接地裝置安裝圖集》
99D562(原99D501-1)《建筑物防雷設施安裝圖集》 JGJ/T16-92《民用建筑電氣設計規(guī)范》
IEC61643-12 《低壓配電系統(tǒng)的電涌保護器選擇和使用導則》
IECI312《雷電電磁脈沖的防護 》
DL/T 620―1997 《交流電氣裝置的過電壓保護和絕緣配合》
三、 防雷檢測
對高層建筑的防雷設計比較科學的方法是首先進行雷電風險評估。雷電風險評估綜合了建筑物所處的地理、土壤、氣象以及建筑物使用、設備等情況,進行高層建筑防雷設計時,不能單純的從建筑物使用性質(zhì)來確定防雷類別。全面執(zhí)行防雷管理辦法,提高產(chǎn)品和工程質(zhì)量。
四、防雷措施
1、 接地網(wǎng)
當發(fā)生雷電時,雷電流通過引下線向自然接地體周圍大地泄流外散,土壤呈現(xiàn)的電阻稱為接地電阻,接地電阻公式:Rd=p*ε/c,我們從公式可以得出一個結(jié)論:當增大接地網(wǎng)的面積,接地電阻將減小。接地網(wǎng)是指水平方向由鋼筋綁扎或焊接成的網(wǎng)格,水平鋼筋組成的接地網(wǎng)可以近似看成一塊獨立的平板,它的電容主要由它的面積決定的。在設計利用底板接地網(wǎng)做自然接地體時,不應認為自然接地體埋得越深,接地電阻就越小,應通過地質(zhì)勘探報告了解周圍的土質(zhì)情況。
2、引下線
引下線的作用是將避雷帶與自然接地體連接在一起,使雷電流構(gòu)成通路。在高層建筑中利用其柱或剪力墻中的主筋做為引下線,隨主體結(jié)構(gòu)逐層串聯(lián)焊接至屋頂與避雷線連接。為了安全起見每條引下線不應少于兩根主筋,主筋的截面不應小于Φ16mm。 在高層建筑的設計、施工中,利用其結(jié)構(gòu)主筋做引下線,這樣做具有經(jīng)濟、實用、易于操作的特點,由于現(xiàn)澆混凝土內(nèi)的引下線不易氧化,所以具有使用壽命長的特點。按建筑物的防雷類別適當減小引下線的間距,這樣做可以迅速分流,降低反擊電壓。
3、避雷帶
避雷帶由避雷線和支持卡子組成,避雷帶應設置在建筑物易受雷擊的層檐、女兒墻等處,其作用是引雷效應,雷電流通過引下線向大地泄流,避免高層建筑物雷擊。
4、均壓環(huán)
在高層建筑的設計和施工中,除了防止雷電的直擊外,還應防止側(cè)向雷擊,超過30米高的建筑物,應在30米及其以下每隔三層圍繞建筑物外廓的墻內(nèi)做均壓環(huán),并與引下線連接。保證建筑物接構(gòu)圈梁的各點電位相同,防止出現(xiàn)電位差。
5、內(nèi)部防雷接地裝置
高層建筑除了采用外部防雷措施外,還應采用內(nèi)部防雷措施。
籠式避雷網(wǎng)利用建筑物柱、剪力墻內(nèi)的豎向鋼筋迅速分流并疏導雷電流,與板內(nèi)水平鋼筋形成籠網(wǎng)狀,在一定程度上屏蔽雷電流產(chǎn)生的電磁感應,還可以達到良好的均壓環(huán)及等電位作用。現(xiàn)代高層建筑物內(nèi)重要的強、弱電機房多采用籠式避雷網(wǎng),因此建議在高層建筑的防雷接地系統(tǒng)的設計和施工中,將內(nèi)部防雷接地裝置與外部防雷接地裝置結(jié)合起來,構(gòu)成統(tǒng)一的防雷接地系統(tǒng),防雷效果將是最理想、安全和可靠的。
四、總結(jié)
目前隨著計算機、通訊、控制(3C)技術的發(fā)展,對防雷接地系統(tǒng)提出了更高的要求,以保證建筑物內(nèi)的各種設備的正常工作。高層建筑的雷電災害必須引起我們的高度重視,必須加強對防雷設計進行研究、審核、檢測和驗收等一系列規(guī)范化管理,從而達到高層建筑防雷的真正安全。
參考文獻:
[1] GB50057―1994,建筑物防雷設計規(guī)范[S].
[2] 孫景梅.高層建筑的防雷[J].設計建筑電氣,2001
[3] 夏光文.高層住宅接地與設備接地系統(tǒng)[J].建筑電氣,2001.
關鍵詞:烯效唑;多克隆抗體;時間分辨免疫分析
Time-resolved Fluoroimmunoassay for the Detection of the Uniconazole
HONG Xia1,2*,XING Hai-long2,WANG Chenchen2
(1.School of the Environment and Safety Engineering,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,Jiangsu,China;2.Jiangsu wise science and technology development Co.LTD,Zhenjiang 212009,Jiangsu,China)
Abstract:A sensitive time-resolved fluoroimmunoassay(TRFIA)based on polyclonal antibody for detection of uniconazole was developed. A hapten was synthesized and conjugated with ovalbumin(OVA)as the coating antigen. The coating antigen was coated by physical adsorption onto a 96 well microtitre plate,which was then competed with uniconazole in the sample for limited quantity of anti-uniconazole antibody labeled by Eu3 +.Uniconazole in the samples could be determined by direct competition method. At spiked different levels (0.05~0.5 mg/kg in water and soil) recoveries of uniconazole were from 80.4%~116.8%, with CV of 2.6%~8.7%. The TRFIA could be a convenient tool for monitoring uniconazole residues in environment and food samples.
Key words:uniconazole;polyclonal antibody;TRFIA
烯效唑,屬三唑類化合物,是80年代日本住友化學公司推出的高活性的植物生長延緩劑和殺菌劑。烯效唑延緩作物生長的作用機制在于它能有效的抑制植物體內(nèi)赤霉素(GA)的生物合成,減少體內(nèi)乙烯含量,增加細胞分裂素(CTK)含量,提高體內(nèi)CTK/IAA的比例,從而使這些內(nèi)源激素調(diào)控的生理效應發(fā)生相應的變化[1]。烯效唑常用于大田作物、果樹、蔬菜、煙草、花卉等眾多植物,活性高于多效唑,同時毒性較低,被廣泛用于農(nóng)業(yè)、園藝植物生產(chǎn)中[2]。
隨著人們對環(huán)境與食品安全關注程度逐漸加大,迫切需要建立快速靈敏的檢測烯效唑殘留的分析方法。烯效唑殘留測定方法主要是高效液相色譜(HPLC)[3]和氣相色譜(GC)[4],這些方法前處理比較繁瑣,檢測結(jié)果受樣品凈化、濃縮等步驟的影響,不適合進行批量樣品的快速檢測,而免疫學技術在農(nóng)藥殘留分析和環(huán)境監(jiān)測中的應用越來越深入,已成為農(nóng)藥殘留分析的重要方法之一。抗烯效唑農(nóng)藥的多克隆抗體的酶聯(lián)免疫分析技術(ELISA)也有報道[5],但是檢測靈敏度不高。時間分辨免疫分析技術具有高靈敏性、高選擇性、快速等優(yōu)點,可以彌補普通ELISA免疫分析技術靈敏度的不足。本研究制備了烯效唑半抗原和多克隆抗體,建立了烯效唑的TRFIA殘留檢測方法,為環(huán)境與食品中痕量烯效唑殘留高靈敏檢測提供技術支持。
1 資料與方法
1.1一般資料
1.2包被原的合成
1.3固相包被板的制備
1.5添加樣品的處理 河水經(jīng)過濾,添加0.05~0.5mg/L的烯效唑標樣,用甲醇的PBS稀釋,進行測定。稱取10g土壤,添加0.05~0.5mg/kg的烯效唑標樣,混勻,放置過夜,加入40ml二氯甲烷,超聲10min,4000r/min離心10min,取上清液20ml于圓底燒瓶中減壓濃縮,用含甲醇的PBS定容到10ml。每個處理設3個重復,各設一個空白對照,用建立的TRFIA法對樣品進行分析。
1.6測定
2 結(jié)果與分析
2.1包被原的鑒定 對半抗原、載體蛋白及偶聯(lián)物進行全波長掃描見圖1,偶聯(lián)物的紫外吸收光譜發(fā)生了明顯的變化,具有載體蛋白和半抗原的紫外吸收特征。根據(jù)它們在280nm波長下的摩爾吸光系數(shù)估算得到包被原的結(jié)合比為7:1。
圖1 半抗原、卵清蛋白及偶聯(lián)物的紫外吸收光譜
圖2 烯效唑TRFIA標準曲線
2.4抗體的特異性 用TRFIA在相同的條件下測定與烯效唑結(jié)構(gòu)相似化合物對抗體的交叉反應,計算各自的抑制中濃度IC50和交叉反應率CR(表1),結(jié)果表明得到的抗體對烯效唑有較好的選擇性,對大部分三唑類殺菌劑沒有明顯的交叉反應。
2.5回收率測定 添加不同濃度的的烯效唑標樣在河水和土壤中,按照TRFIA進行測定,檢測結(jié)果見表2。在水和土壤中分別添加烯效唑標準溶液,平均回收率為80.4%~116.8%,變異系數(shù)為2.6%~8.7%,符合農(nóng)藥殘留檢測要求,符合農(nóng)藥殘留檢測要求。
3 討論
本文采用TRFIA技術進行烯效唑檢測。其靈敏度(IC50)較ELISA[5]成倍增加,分析靈敏度可達到0.2mg/L,靈敏度提高了一個數(shù)量級。可見TRFIA法檢測烯效唑比ELISA法靈敏度上具有明顯優(yōu)勢。TRFIA具有獨特的熒光特性,特異性熒光的衰變時間極長,為傳統(tǒng)熒光的103~106倍,激發(fā)光與發(fā)射光之間的Stokes位移可達290 nm,而普通熒光素的Stokes位移僅為28nm[6-9],使得試劑標準曲線飄移小,更提高了試劑的穩(wěn)定性和準確性。本文在研究過程中還發(fā)現(xiàn),標記抗體和Eu3 +的標記量的控制非常重要,它們的量直接影響靈敏度和本底值。研究發(fā)現(xiàn):低濃度標記抗體,標記效率高,但本底高;高濃度標記抗體,有助于提高靈敏度和降低本底,但其標記效率有所下降。
綜上所述,本文建立的烯效唑-TRFIA法,具有靈敏度高和重復性好等優(yōu)點,能夠滿足環(huán)境與食品中痕量烯效唑的檢測需求,具有良好的應用價值。
參考文獻:
[1]余世銘,韓慶嶺.烯效唑及其在農(nóng)業(yè)上的應用[J].現(xiàn)代化農(nóng)業(yè),1995,193(8):4.
[2]徐新娟,黃中文,孫海燕.烯效唑在現(xiàn)代植物生產(chǎn)中的應用[J].河南科技學院學報,35(4):47-49.
[3]廖強,楊文鈺,陳興福,等.澤瀉塊莖中烯效唑殘留的測定[J].農(nóng)藥,2008,47(4):284-285.
[4]陶龍興,王熹,俞美玉,等.烯效唑和多效唑在土壤中的殘留的比較研究[J].農(nóng)藥,1995,34(3):19-20.
[5]江小雪.烯唑醇和烯效唑酶聯(lián)免疫分析方法研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學碩士論文,2010.
[6]SHEN Jianzhong,ZHANG Zhen,YAO Yao,et al.Time-resolved fluoroimmunoassay for ractopamine in swine tissue[J].Anal Bioanal Chem,2007,387(4):1564-1564.
[7]武學成,何林,周克元.時間分辨熒光免疫分析技術及臨床應用[J]醫(yī)學綜述,2006,12(7):434-436.