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關鍵詞:電針血清;神經元;凋亡;β淀粉樣蛋白;阿爾茨海默病;大鼠
中圖分類號:R245 文獻標識碼:A 文章編號:1005-5304(2013)10-0038-03
阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常見的中樞神經系統退行性變性疾病。其主要特征是記憶喪失、認知缺陷
和嚴重的精神神經癥狀。β淀粉樣蛋白(β-amyloid protein, Aβ)是各種原因引發的AD的共同通路[1],Aβ級聯學說是目前研究最多的AD的病理機制之一。臨床和動物實驗均表明,電針治療對AD具有明顯的療效[2-3],但其機制目前尚未完全闡明[4]。電針血清是指針灸處理后的動物血清,以其作為效應物質,通過觀察培養細胞的形態和分子生物學改變,可從體外實驗直接研究針灸的作用機理[5]。本實驗從電針血清是否有效降低大鼠海馬神經元凋亡的角度進一步探討電針治療保護海馬神經元和增強學習記憶功能的作用機制。
1 實驗材料
1.1 動物
成年SPF級SD大鼠30只(動物合格證號:2008001611157),雄性,體質量350~450 g;出生24 h內SD大鼠20只(動物合格證號:2008001609451),均由上海中醫藥大學實驗動物中心提供。常規飼養,晝夜時間比為1∶1。
1.2 試劑與儀器
Aβ1-40、Aβ25-35(Sigma公司);TUNEL染色試劑盒、MTT試劑盒(碧云天生物技術研究所);抗Caspase-3兔單克隆抗體(Santa cruz);FITC-羊抗兔IgG(Santa cruz);青霉素、鏈霉素粉針劑(華北制藥集團);微管相關蛋白2抗體(MAP-2)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)購自美國cell signaling technology公司。
Morris水迷宮實驗系統(Smart Junior,西班牙Panlab公司),腦立體定位儀(中國人民第二軍醫大學生理教研室),微量注射器(5 ?L,Hamilton,瑞士),G6805A型電針治療儀(常州英迪電子醫療器械有限公司),孔徑0.22 ?m過濾器(Millipore公司),無菌針灸針(0.25 mm×13 mm,吳江市云龍醫療器械有限公司)。
2 實驗方法
2.1 造模
10%水合氯醛(4 mL/kg)腹腔注射麻醉后,將成年大鼠頭顱固定在腦立體定位儀上,頭皮備皮,消毒手術區皮膚,做正中切口暴露前囟,參照大鼠腦立體定位圖譜,以前囟為原點,向后3.5 mm,旁開2.0 mm為鉆孔點,鉆開對稱2個孔,自腦表面進針3.0 mm至海馬,用微量進樣器抽取2 ?L Aβ1-40(用無菌生理鹽水將其稀釋成10 ?g/?L,37℃孵育1周,使其變為聚集狀態),緩慢進針,注射速度0.2 ?L/min,注射完畢,停針5 min后,以1.0 mm/min速度緩慢拔針,縫合皮膚,術后肌肉注射青霉素,連續3 d,以防感染。
2.2 分組與治療
實驗分為正常組、模型組和電針組。對照大鼠穴位圖譜,以13 mm毫針針灸“百會”(頂骨正中)、“腎俞”(第2腰椎下兩旁),連接G6805A型電針治療儀,選擇連續波,頻率為20 Hz。針刺治療每日1次,每次30 min,1周為1個療程,治療4個療程。正常組及模型組正常飼養,不予針刺治療。在治療結束后,各組分別在無菌條件下,下腔靜脈采血,分離血清,過濾除菌,冰凍保存備用。
2.3 原代海馬神經元的培養
出生24 h內SD大鼠,斷頭取腦,分離出雙側海馬組織,消化,吹打后以1×106/mL的密度接種于培養板內。細胞培養7 d后,將其分為正常組、模型組和電針血清組,各組分別更換含有“2.2”項中各組10%血清的培養液,模型組和電針血清組予以 Aβ25-35(26 ?L/mL)處理48 h。
2.4 MTT法檢測細胞增殖
用5 mL MTT溶劑溶解25 mg MTT,配制成5 mg/mL MTT溶液。設置調零孔,每孔加入10 ?L MTT溶液,在細胞培養箱內繼續孵育4 h,使其充分形成紫色結晶。每孔直接加入100 ?L Formanzan溶解液,在細胞培養箱內繼續孵育,直至在普通光學顯微鏡下觀察發現 Formazan全部溶解。在570 nm波長測定吸光度(OD值)。
2.5 免疫組織化學染色
TUNEL染色:取出細胞培養板,免疫染色固定液固定細胞30 min,0.01 mol/L PBS洗滌1次,免疫染色洗滌液清洗1次, 0.01 mol/L PBS洗滌2次,在樣品上加50 ?L TUNEL檢測液,37 ℃避光孵育60 min。PBS洗滌3次,抗熒光淬滅封片液封片后于熒光顯微鏡下觀察并拍照。
Caspase-3免疫細胞化學染色:取出細胞培養板,免疫染色固定液固定細胞20 min,0.01 mol/L PBS洗滌3次,加入免疫染色封閉液,在37 ℃條件下孵育30 min,加入抗Caspase-3兔單克隆抗體,在4 ℃條件下孵育過夜,用PBS浸洗細胞3次,加入FITC-羊抗兔IgG,在37 ℃條件下孵育1 h,PBS洗滌3次,加入Hoechst 33342室溫染色10 min,經PBS充分清洗后,緩沖甘油封片后熒光顯微鏡下觀察并計數陽性細胞個數。
3 統計學方法
采用SPSS15.0統計軟件進行分析。數據以―x±s表示,組間比較采用方差分析。P
4 結果
4.1 海馬神經元的培養與鑒定
接種后24 h,在倒置顯微鏡下可見全部細胞已貼壁,且伸出短小的突起。培養7 d后神經元胞體飽滿,多呈梭形、錐形,少數呈多邊形,細胞的突起進一步增多增長,大部分神經元有2~5個突起,形成神經元網絡(見圖1)。免疫細胞化學染色顯示,培養7 d的大鼠海馬神經元NSE和MAP-2抗體標記陽性(見圖2)。NSE和MAP-2雙標陽性細胞數達90%左右。
4.2 電針血清對神經元增殖的影響
MTT檢測結果發現,與正常組比較,模型組細胞活力顯著下降(P
4.3 電針血清對神經元存活的影響
經Aβ處理48 h后,細胞發生明顯凋亡,部分細胞從皿底脫落,甚至漂浮;與模型組比較,電針血清組凋亡細胞數明顯減少(見圖4)。通過計數200倍視野下TUNEL陽性細胞個數,經統計學分析發現,模型組和電針血清組凋亡細胞數目顯著增多,與正常組比較差異有統計學意義(P
4.4 電針血清對Caspase-3表達的影響
在正常組,Caspase-3 表達水平很低,只有少數細胞表達Caspase-3。經Aβ處理48 h后,Caspase-3 表達水平明顯升高,與正常組相比差異具有統計學意義(P
5 討論
AD在中醫學中散見于“郁證”、“癲狂”、“呆病”、“健忘”等證的描述中,其發生和腦、脾、腎關系密切。針灸通過刺激人體特定的腧穴,激發經絡之氣,調整臟腑、經絡及大腦的機能,促進衰退神經元的能量代謝,防治AD。本實驗中,百會位于巔頂,通過督脈入絡腦,乃局部取穴,以醒腦寧神;腎俞補腎養髓,髓海得充,可健腦益智,從而治療老年癡呆。然而針灸治療AD的具體作用機制目前尚未完全闡明。
AD的神經病理特征包括細胞外老年斑和細胞內神經原纖維纏結的產生,以及基底前腦支配海馬和皮質的膽堿能神經元的丟失。目前普遍認為有神經毒性的Aβ聚集是AD發生和發展的始動因素[1],所以AD 治療主要集中在減少Aβ沉積和阻斷具有毒性的Aβ的形成[6]。而海馬與學習記憶功能密切相關,因此選用原代培養的海馬神經元作為研究針刺治療AD的作用機制較為理想。
Caspase家族是細胞凋亡過程中的關鍵元件,其激活與超常表達均引起細胞凋亡,可通過與眾多蛋白因子的相互作用調控細胞凋亡[7]。Caspase-3是Caspase家族中最重要的凋亡執行者之一,是細胞凋亡蛋白酶級聯反應的必經之路,在凋亡的執行階段,負責對全部或部分關鍵性蛋白的酶切[8]。我們前期實驗表明,電針治療可以降低大鼠海馬區Caspase-3的表達,調控Bcl-2和Bax的表達平衡,維持神經元的存活[9]。而本研究發現,電針血清可以促進體外培養神經元的增殖,并可對抗Aβ誘導的凋亡。由此推測,電針治療可能通過刺激動物血清成分的變化而發揮保護神經元并改善學習記憶的作用。
最近的研究表明,電針能有效調節帕金森病患者血清中腦源性神經營養因子的水平,從而緩解抑郁癥狀[8]。也有學者發現,電針腎俞、風府、足三里、三陰交可以提高腦組織和血清超氧化物歧化酶、過氧化氫酶活性,降低丙二醛含量,增強氧自由基清除能力從而發揮對神經元的保護作用[11]。在AD大鼠模型,電針治療的過程中血清中成分發生什么樣的變化,某種或某些神經營養因子的表達和分泌是否提高,值得進一步深入研究。
綜上所述,電針血清可以有效降低AD大鼠海馬神經元凋亡,而其機制可能是通過降低凋亡執行蛋白Caspase-3的表達,對抗Aβ的神經毒性,發揮對AD海馬神經元的保護作用。
參考文獻:
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xxx居委會:
本人叫xxxxx(身份證xxxxxxxx) ,女,19xx年x月xx日生于廣東 xx,戶口在xxxxx,于20xx年x月x日與xxxx(xxxxxx)初婚,并于 20xx年x月x日在xx人民醫院生一兒子,名為xxx。當時因身體原因, 沒有及時上環并為小孩上戶口,現特申請貴所辦理林鈿的落戶手續, 請予以批準。
特此申請。
申請人:
20xx年xx月xx日
新生兒入戶申請書范文二
xxx公安局城內派出所:
本人叫xxxx(身份證:xxxxxxxxxxx) ,女,xxxx年xxx月xx日生 于廣東xxxx,戶口在xxxxxxxxxxx,于 XX 年x月x日與xx(身份證: xxxxxxxxxxxx)初婚,
并于 20xx年x月x日在xx人民醫院生一兒子, 名為xxx。當時因身體原因,沒有及時上環并為小孩上戶口,現特申 請貴所辦理xxx的落戶手續,請予以批準。
特此申請。
申請人:
20xx年xx月xx日
新生兒入戶申請書范文三
xxx公安局:
我叫xxx,性別:男,生于x年x月x日,漢族人,戶口所在地:xx縣xx鎮xx街。因xx原因,向公安機關申請入戶,請予以批準。同時承諾,所提交的證件以及有關材
料真實、合法、有效,復印文本與原件一致,并對因提交虛假證件及材料所引發的一切后果承擔相應的法律責任。
附申請材料:
1、身份證、戶口簿復印件
2、村(居)證明
3、個人書面申請
4、入戶申請審批表
5、醫院的出生證明
在法律不斷完善的社會中,申請書使用的次數愈發增長,申請書是我們提出請求時使用的一種文書。寫申請書時理由總是不夠充分?為了讓您在寫的過程中更加簡單方便,一起來參考是怎么寫的吧!下面給大家分享關于學生救助申請書,歡迎閱讀!
學生救助申請書1敬愛的領導老師:
我是來自商英五班的__同學,因家庭條件不是很樂觀,為減免爸爸媽媽的負擔,特此申請生活補助助學金。
爸爸媽媽快要步入老年了,家庭條件不好,但看到我那么希望繼續學習,所以才不辭辛苦的為我賺取學費。記得那時剛考完高考,接到的成績并不是很理想,我很傷心,也很難過,自己又知道家庭條件不是很好,但是我還是想繼續我的學習之路,因為我知道,對于我們這些從農村出來的孩子,只有學習這條路才能讓我看到未來的希望,也只有努力讀書才能改變我將來的命運,改變我以后家里的情況。為此,我苦苦的哀求爸爸媽媽送我去讀書,讓我繼續我的學業。
開學了,爸爸媽媽好不容易東拼西湊的給我弄到了學費,看著這一桌子零零碎碎的錢,我真的心里很難受,并在心中暗想,一定要努力學習,將來要報答我的父母。真的很感謝他們為我做的這一切。
隨著時間的流逝,我一天天的長大,而爸爸媽媽卻被無情的時光印上了深深的皺紋,而且他們的身體也是一天不如一天,整日的操勞,給他們年邁的身體是雪上加霜。老師經常對我們說,出生在農村不是我們的錯,但是走不出農村就是我們的錯。是的,我要珍惜父母給我的這次機會,我要努力學習。將來好好的報答我的父母。
在此我希望領導老師給予我這次機會,讓我能申請到補助金,能為減少一點我父母的負擔,我深感謝意!
此致
敬禮!
申請人:
日期:
學生救助申請書2尊敬的校領導和老師:
你們好。我是來自計科(2)班的學生___,由于家庭情況確實比較困難,所以想向學校提出申請助學金。
我的家里住在一個湘潭縣的小村莊莊里,家里有5口人,然而家中的勞動力只有父親和母親,可是他們一直有病在身。因為沒有文化,沒有本錢,只好坐苦工和短工為生,十幾年來一直過著貧困的生活。
在學習上,本人在校期間品行成績良好,遵紀守法,無違法違紀行為,誠實守信,做事遵守承諾。在生活上,因為家庭經濟困難,所以生活儉樸,勤儉節約。
加入能夠獲得助學金,我將在今后的學習中投入更多的精力,來努力完成學業,爭取優秀畢業,為班級和學校爭光。通過自己的不斷努力和不斷汲取知識和方法為將來打好基礎。為今后的學業做準備。
特此申請,望予批準。
學生:__
_年_月_日
學生救助申請書3尊敬的.各位校領導:
我是____級__本科_班的學生,家住在農村,父母是農民,知識水平不高,我們家是村上的貧困戶,重點扶助對象,家庭經濟的主要來源均來自那幾分微薄的農田收入,平日生活拮據,家里房屋破舊,里面那僅有的幾件家具都還是父母結婚時置辦的,廚房還是搭建在家里的過道上,在雨下得特別大的天氣里,爐火都升不起來,更不用說要想在該吃飯的時間里吃飯了,那幾乎是不可能的了。
這些年來,我讀書的費用都還是問親戚朋友借和靠他人的幫扶,即使是現在我所穿的很多的衣服都還是同學或朋友那些不穿了的衣服送我的。
從開學到現在,由于多種原因,我不知道"飽"是什么滋味,"飽"是什么,或許它已不存在了,于我來說。物價的上漲,讓我必須在那原已微薄得可憐的生活費里必須在精打細算,否則,失去的將更多,不知道的也將更多。
鑒于上述的多種原因和家庭經濟確實困難,特申請生活補貼金,望個位校領導能夠批準。
申請人:___
20__年9月13日
學生救助申請書4尊重的系領導、老師:
您們好!
我叫蔣訓?,是西北農林科技大學人文學院05級社會學專業的一名學生,家住在山東省聊大學生助學金申請書城市嘉明經濟開發區邱廟村,在這里特向系引導、老師申請助學金。
也許大家會以為,既然家住在經濟開發區內,那么家里生涯程度應當不錯,不應當再申請助學金。其實不然,在我的故鄉,雖然國度屢屢出臺文件明文規定制止非法征用農民耕地,但是由于基層政府和農民所處的位置和控制的權利的不同,當地,政府仍然不斷的征用農民土地,并應用信息不對稱的優勢,成為土地開發的受益者,而農民則成為了土地開發的就義品。這樣由于農民損失潦攀賴以生存的土地,而自己又無一技傍身,沒有了經濟起源,只能靠菲薄的土地補償來生涯,坐吃山空,逐漸成為城市和農村之間的一個特別階層,即沒有城市戶口,無法享受城市居民的待遇,"上不去";損失了土地,無法重新成為農民,"下不來",成為了城市邊沿的"新貧民"。不幸的是,我的家庭恰好成為了其中的一員。
聽聞現在有了這樣一次申請助學金的機遇,為了減輕家庭的累贅,完成學業,特向系引導、老師提出此次申請,請老師予以評判審核。
此致
敬禮!
申請人:___
20__年9月13日
學生救助申請書5尊敬的學校領導:
您好!
我叫劉學旺,來自計算機系15級軟件開發專業0717班,我是一名喜愛讀書、熱愛集體并且性格溫和的男孩。我出生在一個貧窮而又落后的小村莊。家中有五口人,爸媽文化淺薄,在家務農,由于多年的勞累,爸媽兩人身體狀況較差,農業收入低微,所以全年收入十分微薄,我還有一個哥哥正在在____大學讀書,家中一年省吃儉用的錢大多都供給了我和哥哥讀書,與此同時家里也欠下了一定的債務。
從很小的時候起,爸媽就教育我:學習的目的是為了將來可以對國家和社會貢獻出自己的一份力量,所以需要的不僅是豐富的知識,更重要的是具備良好的社會責任感和個人道德修養。今年我圓滿的完成了12年的學業,光榮的參加了高考。當我得到了___的錄取通知書的時候,全家人都很高興。因為我們倆是我那個家族里難能可貴的大學生,也是我們村子里多年才出的大學生。但是對于一個普通的農村家庭來說兩個大學生的學習費用真是一個天文數字。為此家中面臨著巨大的壓力,家中實在是再拿不出足夠的錢來供我上大學,可是我又不想因為貧困而喪失上大學的機會,我知道這個社會如果沒有知識沒有文化是無法生存下去的。這種深深扎根在心中的觀念使我力爭成為一名全面發展的學生。所以我一定要完成我的學業。故向學校證實我的家庭情況,定于特困生類型,以便我能在校獲得各種補助,幫助我順利完成學業。
此致
敬禮!
受理日期:注冊號:公司(企業法人)注銷登記申請書公司(企業法人)名稱:
(蓋章)法定代表人:
(簽字)公司企業法人
非公司企業法人
網址:咨詢電話:96633廣州市工商行政管理局制廣州市工商行政管理:本企業申請注銷登記,承諾本申請書所填內容及所有提交的文件、證件是真實的、有效的,符合國家有關法律法規的規定,并承擔因材料虛假所引發的一切法律責任。所提交的文件、證件如下:序號文件、證件名稱在對應欄內打鉤1.由法定代表人簽署的《公司(企業法人)注銷登記申請書》2.股東共同委托人的證明3.股東會申請注銷登記決議或決定4.主管部門或清算組織出具的清理債權債務的文件和清理債務完結證明5.聯營終止協議書(聯營企業)6.清算小組(3人以上組成)出具的清算報告(須經股東確認);清算報告的內容包括:(1)清算的原因、期限、過程;(2)債權、債務的處理結果;(3)清算財產的處理結果。(有限公司)7.稅務機關出具(國稅、地稅)完稅證明8.企業印章9.企業法人營業執照正、副本10登記機關要求提交的其他文件謹此確認。
法定代表人:
(簽字)聯系電話:
年
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辭職是一件比求職更需要技巧的事情,如何做到優雅地轉身,又不得罪人呢?大家可以來參考辭職申請書范文。下面是小編為大家帶來的2021公司員工個人辭職申請書十篇,歡迎大家查閱!
個人辭職申請書范文1尊敬的領導:
您好!
時間匆匆,轉眼我來到___餐廳已經有不少日子了。在這段時間里,我真的十分感謝你你的照顧和幫助,您和同事們對我伸出的援手,讓我順利的適應了這份工作,也適應了___餐廳的環境。對此,我真的無比的感激!
在這樣一個優秀且積極的環境下,我懷揣著自己的熱情和奮斗精神,努力的在崗位中發散自己的光和熱,希望能在自己的努力下,為___餐廳貢獻一些有意義的努力。但是,隨著自己的努力,我卻越發的認識到,自己在工作中漸漸出現了各種各樣的問題!
這樣的發展實在是我沒有想到的,雖然我想要努力的去彌補自己的問題,但也許是真的不適合吧,我在工作中始終都適應不了自己的任務。我很慚愧,也很抱歉。我真的十分喜歡這里的環境,以及這個溫暖的團隊,但我自身卻無法適應這里的工作。這幾次來,如果不是領導和同事的幫忙,那我可能就會犯下更大的問題了!
為此,我也重新的反思了自己的問題。考慮到自身的情況以及今后的工作,我充分的了解到自己已經不能繼續在這里工作了。為此,我決定在此向您遞交這份辭職申請,望您能原諒。
我真的很遺憾,工作這些天,我也猶豫了很久。但畢竟我難以克服自己的毛病,這對工作而言是不允許,也是不應該的。且通過這些日子對工作的充分認識。我也了解到自己其實并不適合這份工作,這讓我在工作中漸漸失去了動力和熱情。這對工作的影響實在太大了。
回顧來到這里的這些日子,每天我都學到并體會到許多新奇的事情。作為一名服務員,我實在無法順利完成自己的工作,這給您帶來了許多的麻煩和問題,真的十分對不起。
雖然我要離開了,但在這段日子的經歷卻會一直會保存在我的心底。我十分清楚,這里是一家非常的優秀的餐廳,無論是領導還是員工,都是全心全意的想要將自己的工作做好,要為顧客帶來最好的服務和享受。但我實在無緣繼續在這個隊伍中發展自己,所以我選擇主動退出,希望能盡早尋找到適合自己的地方。
最后,我也在此祝愿各位工作順利!祝愿___餐廳在今后的日子里越做越紅火!生意興隆!
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文2尊敬的__:
感謝您閱讀我的離職信!
經過幾個月的慎重考慮,和內心的掙扎.我決定上交這封無奈的離職信,重新定位我的生活狀態。
首先要感謝的是這2年多工作以及來培養我、幫助我,支持我的各級領導和兄弟姐妹們,這份感情是無法用言語來表達的。
20__年9月9日,我又一次為了夢想闖進了夢寐以求的電視臺大門。經過2年多工作的磨練,這段美好的歡樂時光深深地印入了我的心里,暫且不談成敗得失,起碼和兄弟姐妹們相處是真誠的,沒有任何戒心的。
記憶猶新的是20__年年底在新聞中心開會的時候,會議內容是讓大伙談談對社會新聞的看法,并隨即對開播《新聞趕擺場》表態,很多老同志由于種種原因表示反對,而且還有老記者煽然淚下,用自己的事例反對開播新欄目。當時我唯一的感受是無助、無奈、無聊,甚至已經絕望,可回頭想想確實不然,大伙都是肉長的,誰有膽兒拿自己的前途開玩笑呢!值得慶幸的是,在領導的堅持下,《新聞趕擺場》最終還是誕生了。
再者,感謝各位領導讓我發揮了自己的優勢,幾部可以稱為我的“實驗”片的短紀錄片隨之誕生并上演。這些東西都是我短短20幾年的思想經驗,雖然幼稚、極端,但卻是我的人生態度的體現。擁有這樣的機會是不可多得的,甚至是得了一次少一次,我十分珍惜它,在此,再一次感謝各位領導的支持。
我是個熱愛哲學的人,雖然學得淺顯,但隨時隨地都在問自己這樣的問題:
你為什么活著?你活著有意思嗎?這也許就是我的人生態度:雖不盡如人意,但求無愧于我心。
往復循環的日子,同樣的工作、同樣的工作內容、同樣的采訪對象、同樣的選題、同樣的為人處世原則、同樣的商業性質、同樣的用酒精揮發著自己的假面、同樣的處理無端、無聊的事情、同樣的沒有時間去捫心自問:“你為什么活著?你活著有意思嗎?”
或許可笑、或許可悲,或許無知、或許無聊,但這是我作出離職的依據。該如何正確定位我的人生目標呢?去年12月中旬的時候就開始考慮這個問題了,隨著時間的推移,問題迎刃而解。首先是家人的支持,其次是兄弟姐妹們的鼓勵,仔細想想,現在是該我離開的時候了。
不經歷風雨,怎么見彩虹?年輕是需要付出代價的,年輕是有希望的,年輕是銳氣的,希望當我老的時候還能笑看這一切!
感謝所有培養我的人,支持我的人,感謝所有愛我、恨我的人!請領導理解并給予批準!
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文3尊敬的領導:
您好!
我是餐廳的服務員___,在餐廳已經工作了有兩個多月了,但是覺得和我個人的職業發展不是很符合,而且我也想找一份沒那么辛苦的工作,所以向您提出離職的申請,還請您批準。
我當初來做服務員的時候,剛好餐廳缺人手,所以我面試之后就直接上班了,餐廳的生意一直以來都是很好的,所以作為服務員,我們的工作比較忙,從端菜上桌到客人離開,我們收拾桌子,做好衛生,并且迎接接下來的客人,可以說一天下來,根本就沒停過,而且交接班的時候剛好是晚餐的時間,即使我已經交班了,但是因為太忙,我經常都是需要加班來繼續做一段時間的,并不能盡快的下班,不然晚班的同事根本忙不過來,我們也向您提出要加人手的要求,但是服務員的工作本來就很辛苦,也不是那么容易招到手。
不過上周餐廳還是招到了幾位服務員,我也能夠準時的下班了,但是這種勞累的工作以及工作沒有什么技術含量,讓我覺得不是太想做,上菜,衛生,跟進客人點單,雖然能鍛煉自己的服務能力,但是每天基本都是重復的,而且做久了也感覺比較厭煩,雖然我在這兩個多月沒有出什么差錯,客人對我的評價也是不錯的,但我還是沒有感覺這份工作能給我帶來什么成就感。現在餐廳也是在陸續的招募人手,人員是足夠充足的,即使是我離職了,也不會影響餐廳的服務,不會讓同事們的工作驟然增多,所以我決定在這個時間離職,也是想,這樣不會給餐廳造成影響,同時我打算_月_日走,這樣餐廳也有足夠多的時間來再招募一些人,填補我離開后的工作空白。
這兩個月里面,雖然我的工作很勞累,但是領導也是關心我們的,我們加班也是發了獎金,忙完之后,或者閑的時間,也是炒幾個好吃的菜犒勞我們。讓我們得到放松,其實如果沒什么想法,只是想找份穩定的工作的,餐廳的工作還是不錯的,但我還是想出去拼搏下,讓自己得到更多的鍛煉,特別是我還比較年輕,還有很多機會。在離開之前,我也會把我的經驗教導給新來的同事,讓他們盡快熟悉我們餐廳的工作,盡快上手,讓餐廳的服務工作做得更好。請領導放心,這一段時間,我不會懈怠,會做好最后的工作的。
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文4尊敬的領導:
很抱歉在此時遞上了我的辭職信!
轉眼間我在在移動的工作時間近一年了,非常感謝各位領導對我的關心和栽培,讓我在移動工作的這一年里迅速成長,在工作和生活上收獲很大,完成了由學生向社會人的角色轉換,各位領導都是我職業生涯中最尊敬的師長。然而,非常遺憾的是,由于我個人原因,從長遠的職業生涯發展規劃考慮,我決定辭去目前這份工作。
這是我這一生中最難做出的一個決定,這段時間心理一直矛盾重重,猶豫不決,我在中國移動邁開了職業生涯的第一步,舍不得這里和藹可親的領導;舍不得歡笑一堂的同事;舍不得其樂融融的移動"大家庭";忘不了縉云山上"新動力"新員工培訓大本營的美好時光,讓我從此有了"移動人"的歸屬感;忘不了沙坪壩片區的體驗式實習,讓我第一次對移動公司有了直觀的感受;忘不了集團客戶中心生活和工作的點點滴滴,讓我一步一步地成長。然而,按照我自己的職業生涯發展規劃,我又不得不辭去目前的工作,這種矛盾的心理,讓我倍受煎熬,幾經猶豫,最終做出這個決定。懇請領導理解和批準。在移動近一年的工作中,我主要是做產品管理方面的工作,非常感謝領導委以如此重要的工作,然而,由于個人能力有限,經驗不足,很多地方仍存在不少問題,但在各位領導的悉心指導和同事的熱心幫助下,讓我在工作中不斷的成長進步,也給我的職業生涯打下了堅實的基礎。移動公司"正德厚生、臻于至善"的企業文化,我將銘記于心,在今后的學習和工作中,不斷進取、銳意創新,永不忘自己是一名"移動人"。
在離職之前,我將一如既往的堅守自己的工作崗位,履行日常工作職責,認真完成領導布置的工作,站好自己的最后一班崗。
最后祝公司業績蒸蒸日上,祝各位領導和同仁身體健康,工作順利。
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文5尊敬的領導:
您好!
首先感謝您在百忙之中抽出時間開閱讀我的辭職報告 。
我是懷著十分復雜的心情寫這封的.自從我進入了餐廳之后,由于你對我的指導和信任,使我獲得了許多機遇和挑戰.經過這段時間在餐廳的工作,我從中學到了許多知識,積累了一定的經驗,對此我深表感激.由于我自身工作能力不足,近期的工作讓我覺得力不從心,為此我作了很長時間的思考,我決定遞上辭呈。
為了不因為我個人能力不足的原因影響了餐廳的正常運作,更迫切的原因是我必須在__年2月后參加計算機等級證的培訓,較長時間內都不能上班,所以經過深思熟慮之后,我決定在__年1月前辭去而我在餐廳的工作.我知道這個過程中會給你帶來一定程度上的不便,對此我深表歉意。
感謝你和餐廳各位同事對我的教導和照顧,在餐廳這段經歷對我而言異常的珍貴.將來無論什么時候,我都會以自己曾經是餐廳的一員而感到榮幸.我確信在餐廳的工作歷程將是我整個職業生涯發展中相當重要的部分。
祝餐廳領導和個各位同事身體健康工作順利!
再次對我離職給餐廳所帶來的不便表示抱歉.同事希望餐廳能夠體諒我的個人實際,對我的申請予以考慮和批準。
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文6尊敬的_總:
您好!感謝您抽出時間閱覽我的辭職報告,為此我深感歉意!
承蒙您的信任,給了我到本添公司工作的機會,非常感激公司給予了我這樣的機會在良好的環境中工作和學習,讓我在幾個崗位上都得到了非常大的鍛煉,不止是我自己很多人都看在眼里,公司給予我太多太多的無形財富了。在這里,我有我的認真負責,也有我的消極任性。一路走來,點點滴滴烙入腦海深處。因為要感激很多人,感激我的領導、感激那些與我朝夕相處患難與共的同事。是他們一直用一顆寬容的心,開導我、鼓勵我、培養我。真的很感激這里所有的人容忍了沖動而暴躁的我!
提出辭職我想了很久很久,這么好的機會我都這樣放棄,我自己內心都很惱火:我真是一個不懂珍惜的人。其實,選擇離開真的是非常不舍,因為一些個人原因,個人的工作能力有限,而公司就像高速列車不斷向前進,我卻停滯不前。俗話說"學無止境",人是
需要不斷發展、進步、完善的。我也一直在努力改變,變得適應環境,以便更好的發揮自己的作用。但是我覺得自己一直沒什么突破,而且重復性的工作讓我產生了一些惰性。考慮了很久,我想我是需要去充充電,在有限的生命里盡量多學點知識,不讓若干年后白發蒼蒼的自己后悔年輕時的無知。
在未離開崗位之前,我一定會盡自己的職責,做好應該做的事。最后,希望公司的業績一如既往一路飆升,越走越順!領導及各位同仁工作順利,幸福快樂!
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文7您好!
我是___,是我們銀行里的一名普通員工,現就職有五年了,剛好我與銀行的勞動合同已經快到期,我也在這工作的幾年里想清楚了自己想要做什么了。今天寫此辭職報告給您,我選擇不繼續簽之后的續工合同,決定辭職轉行做其他的。感謝您有這個時間批閱我的辭職。
我一進來簽的就是工作五年的合同,那時自己對這個工作也挺滿意的,挺享受當時的狀態。但您知道做我們一行要么提升自己去選擇在本銀行升職,要么就做一個普工職工,我則是后來的這種,我在前面有機會選擇的時候,我沒有去做抉擇,那時比較佛系,不想有什么改變,比較喜歡安穩,所以就錯過了升職的機會,但是現在看到同我一起進來的同事,都去了更好的崗位,我仍然是在原地,沒有出路,我也急了。在這期間,我也去對自己做了深深的思考,自己是否還在這里工作,還是換一份自己真正喜歡的工作的好。我大概是之前對自己的定位不清晰,就一直覺得有份工作就好,不去想長遠的發展,對自己是否有利。也是經過一個很長的時間去考慮的,最終決定換份工作。所以也是一直堅持把這個合同給挨到期。現在剛好,期限也快過去,銀行和我都互不耽擱,也是到招人的時候,我把這里的工作辭了,您也好招新人,我也好去應聘。本來也是我的不對,一直帶著不樂意工作的心情,工作也做不太好,跟同做事情的人在一起,我的表現也很突出,我這樣對銀行來說是很不好的,是忘恩的,所以呢我就想完結合同就正式辭職,現在向您申請,也是為了之后的手續能夠辦理的順利一點,不會給您添很多麻煩。
我在這里的五年我很幸運,可以一直享受這樣的安穩,度過順利的.前期,之后重新換工作,可能就是截然不同的境況,開始的工作都會有一個適應期,因而會很忙很累,但我應該還是會堅持的。現在我快要離開這里,在這里我表達我對我們銀行的感謝,讓我有一個機會去工作,也給了我們那么多的上升機會,只是我沒有去把握,是我的問題,對此還是覺得我其實有愧于銀行的。此后,我們可能會一分兩別,就此祝福銀行的發展是蒸蒸的日上,不斷向外擴展,祝大家都生活美滿。
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文8尊敬的領導:
您好!
經慎重考慮,我非常遺憾地向單位提出辭職。
來__工作已經一年多了,這是我做的第一份正式的工作,也是份來之不易的工作。在這里我叩開了社會的大門,對社會有了更深一步的了解和看法。
來到__,我學到了不少東西,剛到公司時是維護崗位,工作不懂得講方式方法,沒有與用戶預約上門時間并安排好當日工作時間表或者有的上門時用戶已經好了或是家里沒人,就耽誤了一些時間,造成一些用戶等等時間過久。
轉正后來到客服,對此體會比較深刻。客服工作雖說簡單:接電話、做記錄、回訪用戶使用情況,但想要做好也不是件容易的事情。與用戶交流也不是件容易的事,有的用戶是急脾氣,說話快,你得跟上他的節湊,有的用戶不愿多操作,一上不了網就要求上門,也有的在晚上打維護電話還要求馬上過去,電話中要想辦法讓他多操作,多試幾種方法。如果實在派不了人,和他耐心解釋,一般用戶也都會理解。
客戶是上帝,無論用戶提出什么樣的問題都要根據用戶反映的情況分析和快速的解決。這都是我在工作中學到的經驗。領導也經常提出我需要改進的地方,隨著工作質量一天天提高,我心里也很高興,只要是心態平和,針對發生的問題勤于思考,不明白的多請教資格老的同事,處理問題質量高了,工作效率高了,自己的能力也得到了提升。
一個公司就是一個大家庭,在這里結識了不少好朋友好兄弟,離開確實很是不舍,只能道一聲珍重,后會有期!希望__發展蒸蒸日上,永駐輝煌!
希望行領導能夠體恤我個人的實際情況,對我的申請予以考慮并批準!
此致
敬禮!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文9尊敬的領導:
您好!
首先,非常感謝您這幾年來對我的信任和關照。
這段時間,我認真回顧了這半年來的工作情況,覺得來__飯店工作是我的幸運,一直以來我也非常珍惜這份工作,這半年多來老板對我的關心和教導讓我感激不盡。在__飯店工作的半年多時間中,我學到很多東西,無論是交際方面還是做人方面都有了很大的改善,感謝老板對我的關心和培養,對于我此刻的離開我只能表示深深的歉意。非常感激這份工作給予了我很好的鍛煉機會,但同時,我發覺自己從事這份工作心有余而力不足,長時間的工作讓我有點吃不消。故我決定辭職,請您支持。
請您諒解我做出的決定。我將做到年底結束后離開飯店,以便完成工作交接。我很遺憾不能為__飯店輝煌的明天貢獻自己的力量。我只有衷心祝愿飯店的業績一路飆升!老板及各位同事工作順利!
申請人:haoword
__年__月__日
個人辭職申請書范文10尊敬的酒店領導:
您好!
我是__,這次跟您來辭職,我也是深感不舍,畢竟在__酒店這里也不是一兩天了,我也是有了深刻的感情,我希望能夠在這樣的環境下面提高自己的學習能力,作為一名服務員,我對自己在__這里的工作還是非常有信心的,做服務工作我也是很充實,但是這次的來辭職我也是有原因,我這段時間感覺壓力太大了,平時的工作也是非常的忙碌,在時間上面實在是太緊張了,這段時間以來工作上面頂著太大的壓力了,雖然做服務工作就是這樣,但是現在我也是認為堅持不下去了,我需要讓自己的休息一段時間,我很感激酒店的環境,和同事相處的也是不錯,心里面還是很感激的。
這段時間在工作當中我也是感覺到了自己的力不從心,繼續這樣下去肯定是不好的,對自己的工作是一種不負責任,在__酒店這里做一名服務員我確實是感覺自己的成長了,也是用心了,我渴望能夠得到一個認可,這一點是非常用必要的,在__酒店這里鍛煉我很多,讓我一點點的積累知識,也讓我看到了在這一方面我的抗壓能力是不夠的,半年來我深刻體會到了這一點,這確實還是我的問題,我不希望繼續發生這種情況,畢竟是工作需要用心對待,這段時間我也非常珍惜,同時我也知道我的能力還是不不夠,同比周圍的同事我的抗壓能力是很低的,現在提出辭職是一個的果斷的選擇,是我應該去思考的,我不應該繼續這樣耽誤下去。
作為一名服務員我在工作當中總是做的不夠好,雖然是短短半年,但是我很多時候夠不是讓您很滿意,甚至是出過幾次的工作失誤,這一點是非常不好的,在工作當中我也一直都希望能夠把這些細節做好,我也一直都在思考這些細節,我希望能夠得到您的認可,可是這段時間我也在思考工作方面我確實還是做的不好,很多時候都是一些基本的工作,作為一名服務員這些都是最基本的,可是我一次次的讓你失望,半年來有很多地方做的不好,我也渴望讓自己進一步的發揮好狀態,這一點是毋庸置疑的,作為一名服務員這些都是我應該去思考的,我也是明白這些細節,既然是做這份工作就應做好一點,我沒有達到要求,感受到了很多壓力,我也是能夠體會到了這一點,在__酒店半年很充實,望您批準我的辭職。
此致
敬禮!
申請人:haoword