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      黃芩減壓蒸軟化工藝

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      黃芩減壓蒸軟化工藝

      【摘要】目的研究黃芩減壓軟化工藝。方法以黃芩苷含量及飲片外觀綜合評分為評價指標,采用正交試驗法優選黃芩減壓蒸的最佳工藝。結果最佳工藝為真空度-0.08MPa,溫度100℃,時間20min。結論為黃芩軟化工藝提供客觀的量化指標。

      【關鍵詞】黃芩;減壓蒸;軟化工藝;正交試驗

      1材料

      1.1試藥

      黃芩購自湖南省藥材公司,經湖南中醫藥大學第一附屬醫院周新蓓副主任藥師鑒定,為唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。本研究選用子芩。

      黃芩苷對照品(中國藥品生物制品檢定所,供含量測定用);甲醇為色譜純,磷酸為優級純,水為自制重蒸餾水,其余試劑均為分析純。

      1.2儀器

      Agilent1100高效液相色譜儀(美國安捷倫);AY-120型電子分析天平(日本島津);SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵(鄭州長城);SK5200HKUDOS超聲波清洗器(上海科導);DHG-9076A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海精宏);減壓裝置(自己改裝)。

      2方法與結果

      2.1黃芩藥材酶解實驗考察

      取凈黃芩藥材100g,切成約3mm厚的片,分成2份,1份直接于60℃干燥4h,備用;另1份加適量冷水,于25℃放置24h,使其酶解,觀察切面顏色變化,取出,于60℃干燥4h,備用。將2份樣品進行切面顏色和黃芩苷含量的比較,結果見表1。

      結果表明,黃芩藥材中有黃芩酶的存在,經酶解后,黃芩苷含量下降明顯,為了確保飲片質量,黃芩軟化時必須殺酶保苷。

      2.2正交試驗表的設定

      根據單因素考察結果,選取真空度、溫度、時間為考察因素,按L9(34)正交表設計,各因素與水平見表2。

      2.3樣品的制備

      取9份直徑為0.8~0.9cm的凈黃芩藥材各100g,分別按正交表的9個序號安排,將每份藥材分2層平鋪緊挨放入抽濾瓶中,將抽濾瓶抽真空至規定真空度,迅速通入蒸汽,至容器內溫度達到規定溫度開始計時,并保持這一溫度到規定時間,取出,切1~2mm厚片,加適量冷水,于25℃放置24h,取出,于60℃干燥4h,備用。

      2.4黃芩苷含量測定

      2.4.1色譜條件色譜柱為ThermoC18(5μm,4.6mm×150mm),流動相∶甲醇-0.1%磷酸(48∶52),檢測波長為280nm,柱溫為25℃,流速為1.0mL/min。

      2.4.2供試品溶液的制備取各供試品中粉約0.2g,精密稱定,加70%乙醇40mL,加熱回流3h,放冷,濾過,濾液置100mL量瓶中,用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣,洗液濾入同一量瓶中,加70%乙醇至刻度,搖勻。精密量取1mL,置10mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻即得。

      2.4.3對照品溶液的制備精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩苷對照品適量,加甲醇制成每1mL含58μg的溶液。

      2.4.4標準曲線的制備分別精密吸取上述對照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL,依次注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定,以黃芩苷的進樣量(X)為橫坐標,峰面積值(Y)為縱坐標進行線性回歸,得線性回歸方程為:

      Y=2305.94606X-5.87358,γ=0.9999。

      結果表明,黃芩苷進樣量在0.116~0.580μg范圍內,與其峰面積呈良好的線性關系。

      2.4.5樣品的測定取各制備好的供試品溶液,經0.45μm濾膜過濾后,進樣10μL,按上述色譜條件測定,以干燥品計算含量。

      2.5外觀指標綜合評分標準

      根據各種文獻資料[3]和實際操作對比,將飲片切面光滑度、完整性、切面顏色(黃色或變綠)進行綜合評價。方法如下:將各軟化切制后的干燥飲片分別稱定質量,然后①選取切面光滑平整的飲片,稱定質量,計算每份樣品光滑平整飲片所占百分率;②選取完整無破損的飲片,稱定質量,計算每份樣品完整飲片所占百分率;③選取飲片顏色鮮黃且無變綠的飲片,稱定質量,計算每份樣品鮮黃無變綠飲片所占百分率。將各項指標按不同的系數計分,得外觀綜合評分。

      2.6結果

      2.6.1黃芩苷含量結果分析黃芩苷是黃芩中具顯著藥理活性的最主要成分,因此,以黃芩苷含量為指標考察最佳軟化工藝合理可行。黃芩苷含量結果及方差分析見表3、表4。

      由表中直觀分析結果可知,各因素對減壓蒸工藝黃芩苷含量的影響程度主次為B>A>C,即溫度>真空度>時間;方差分析結果表明,A(真空度)、B(溫度)因素的影響具有顯著性意義,C(時間)因素無顯著性差異,以A3B3C2組合為佳。

      2.6.2外觀綜合評分結果及方差分析最佳軟化工藝條件,既要保證藥材易于切制,又能殺酶保苷。因為光滑平整是衡量藥材軟化好壞最重要的指標,藥材有無變綠現象是衡量黃芩酶是否殺死的重要指標,而飲片是否完整,除受軟化好壞影響外,還受原藥材形狀的影響,故分別按0.4、0.4、0.2的系數計分。評分標準為:各項指標的最大值為100分,其他每項指標值均以最大值為基準,加上100-Ymax,并乘以各自的系數后合計為最后得分。正交表9個實驗安排及外觀綜合評分結果見表5,方差分析結果見表6。

      由表中直觀分析結果顯示,各因素對減壓蒸工藝外觀綜合評分的影響程度主次為B>C>A,即:溫度>時間>真空度;方差分析結果表明,B(溫度)因素的影響具有極顯著性意義、C(時間)因素的影響具有顯著性意義,A(真空度)因素在選擇水平內無顯著性差異,以A3B3C2組合為佳,即在真空度-0.08MPa、溫度100℃條件下,蒸制20min。

      將上述2個方差分析結果進行綜合平衡分析,根據黃芩苷含量、外觀二類評價指標,其最佳搭配分別是A3B3C3、A3B3C2,其中A取A3,B取B3是共同的;C因素在外觀綜合評分中有顯著性意義,C2為最佳水平。綜合起來,減壓蒸最好的軟化工藝為A3B3C2,即在真空度-0.08MPa,溫度100℃條件下,蒸制20min。

      3討論

      減壓蒸是利用藥材被抽真空后,藥材組織間隙中的水分及空氣被迅速抽出來,蒸汽進入后能迅速、均勻地滲入到藥材組織中而達到軟化藥材的目的。減壓蒸不僅縮短了軟化時間,而且不與水直接接觸,減少有效成分的損失,藥材整體吸水量減少,減少藥材皮芯分離的比例。實驗結果表明:用減壓蒸最佳軟化工藝即在真空度-0.08MPa,溫度100℃,時間20min條件下軟化切制的黃芩飲片,其顏色鮮黃,切面光滑平整,切制飲片時破碎率較低。

      由于“枯芩”和“子芩”在質量方面有很大的差異,黃芩苷含量差別較大[4],為了減少實驗誤差,實驗中選用的是“子芩”;軟化工藝中,選用的是同一直徑大小的藥材,也是為了減少實驗誤差,使各平行實驗具有可比性。

      因為軟化后的黃芩飲片中或多或少還有存活的黃芩酶,因此實驗中選取了酶解后的飲片作為各軟化工藝后的供試品測定各項指標。這樣既考慮了工藝本身各因素的影響,同時也考慮了黃芩飲片在以后的貯藏保管中可能出現的各種質量變化。

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