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      淺析分子技術在大麥中的特點

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      淺析分子技術在大麥中的特點

      分子標記技術的發展,為人們提供了一種有效的基因定位研究方法。運用分子標記輔助選擇(MAS),將大大提高有利基因的利用效率。近年來,分子標記技術在大麥種質資源遺傳多樣性、遺傳圖譜的構建、基因定位、QTL等研究方面得到廣泛深入的應用,在大麥遺傳育種研究上具有重大作用。

      分子標記分類及其特點

      根據對DNA多態性檢測手段的不同,分子標記技術分為4大類:(1)以Southern雜交為基礎的分子標記,RFLP標記結果穩定可靠、重復性好,適合于連鎖圖譜的構建。(2)基于PCR的DNA標記技術,具有簡便、快速和高效的優點,如RAPD、ISSR、SSR、STS。(3)結合PCR與限制性酶切技術的DNA標記,如AFLP、CAPS。(4)以單核苷酸多態性的DNA標記技術,如SNP。分子標記的優點:不受季節和環境限制;數量多,遍及整個基因組且分布均勻;遺傳多態性高;與不良性狀沒有必然連鎖,不影響目標性狀的表達;共顯性遺傳,信息完整;能在早代進行選擇,加速育種進程;穩定性、重現性好;信息量大,分析效率高;檢測手段簡單快捷,易于實現自動化;有些分子標記之間可以進行轉換,從而使分子標記應用起來更方便。分子標記技術依靠提供準確、穩定可靠的DNA水平的遺傳標記,極大地促進了作物遺傳與育種研究的深入發展。

      應用

      1分子標記在大麥遺傳多樣性的研究和應用越來越廣泛。1997年Russell等[2]利用RFLP、ALFP、SSR、RAPD4種分子標記分析了18個栽培大麥的遺傳多樣性,結果顯示4種標記在每個材料中都能得到特有的指紋。Struss等[3]利用SSR標記研究了163份大麥材料的遺傳多樣性,地理分布較近的材料聚類在一起。楊振華等[4]利用32對SSR引物將35份啤酒大麥按遺傳相似度劃分為4大類。蔣瑋等[5]用28對SSR引物對60份啤酒大麥材料進行遺傳多樣性分析,SSR標記能夠有效的將它們分開。通過遺傳多樣性分析,可明確大麥品種遺傳多樣性的現狀以及它們之間的親緣關系,為種質篩選和使用提供可靠依據,也為雜交育種中選配親本提供分子水平上的理論支持。2.2構建遺傳圖譜隨著分子生物學發展、研究的深入和大量分子標記的開發應用,大麥分子遺傳連鎖圖譜的構建取得了重大進展。1991年Heun等[6]用Proctor×Nudinka雜交F1花藥培養得到113個株系的DH群體構建了第一張大麥RFLP遺傳連鎖圖,總共有157個標記。Costa等[7]構建了一張含有723個標記的分子圖譜,包含12個形態標記和711個分子標記,這些標記在著絲粒區域有呈簇狀存在的趨勢。2006年Wenzl等[8]用DArT、SSR、RFLP、STS和多個形態標記構建了一張高密度的遺傳連鎖圖,而且把2085個DArT位點整合到該圖譜中。2007年Hearnden等[9]利用DH群體構建的大麥遺傳連鎖圖中包含536個SSR標記和442個DArT標記。加強大麥遺傳圖譜的構建與整合,將為大麥分子育種的深入研究和應用奠定可靠的理論基礎。2主要基因的定位近年來,大麥農藝性狀的QTL定位研究得到迅速發展,涉及種子休眠性、抗病性、抗逆性、產量及其構成因素等所有的農藝性狀。利用分子標記技術為定位大麥重要性狀的主基因提供了一個方便可行的途徑,比起傳統的根據表型選擇要精確高效許多。許多控制作物重要農藝性狀表現的主基因和控制數量性狀的QTL定位,為這些性狀的分子育種及定向改良奠定基礎。Backers等[10]利用RFLP標記共鑒定出54個QTL,這些性狀包括抗大麥網斑病與白粉病、抗倒伏性、株高、脆莖、脆穗、抽穗期、粒形、粒長、粒寬和產量等。Thomas等[11]用RFLP標記,利用大麥品種Blenheim×E22413的分離群體,找到2個與產量性狀相關的QTL,4個千粒重QTL,6個子粒含氮量QTL,3個浸出率QTL。Tinker等[12]利用兩個大麥春性二棱品種Harrington×TR306雜交構建了包含150個家系的DH群體,利用這個群體定位了包括抽穗期、成熟期、產量、株高、粒重、粒容重、倒伏等性狀在內的56個QTL。Saeki等[13]通過RFLP標記找到了位于5HS染色體上對大麥黃花葉病毒的所有毒系都具有抗性的基因rym3兩側的兩個標記MWG28和ABG705A,與rym3的遺傳距離分別為7.2cM和11.7cM。張京[14]把我國大麥矮源品種所攜帶的基因uz定位在染色體3H上的SSR標記HVM22和HVM60之間,遺傳距離只有3.4cM和10.6cM。

      目前,大麥QTL定位工作發展很快,但和其他農作物相比差距還很大,在QTL精細定位和圖位克隆方面研究比較少。因此,要加強這方面的研究,為高效利用大麥優良種質資源、高產優質大麥品種的培育提供新的策略和方法。3展望大麥分子標記應用研究發展很快,已經建立了較為完整的遺傳圖譜和定位了許多重要基因。但是我國大麥分子標記輔助育種與國際先進水平還有較大差距,主要原因是對重要農藝性狀的遺傳基礎研究甚少,主要研究集中在大麥的高產栽培技術、植物學分類和遺傳多樣性等研究方面。

      因此,必須在注重相關性狀的分子標記和構建作圖群體的同時,加強引進、發掘、保存和利用國外種質資源,對發展我國大麥分子標記研究仍然十分重要。將分子標記技術與常規育種相結合,才能夠發現和有效地利用蘊藏于種質資源中的有利變異。同時,利用國外構建的遺傳圖譜和定位的基因,根據我國實際情況,把科研重點放在對大麥產量、品質上,通過分子標記方法解決問題,使我國大麥育種趕上世界先進水平。

      作者:牛小霞張想平單位:甘肅省農墾農業研究院

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