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      銀鯽養殖論文:銀鯽病原菌試驗研究

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      銀鯽養殖論文:銀鯽病原菌試驗研究

      本文作者:夏飛1,2梁利國2謝駿2作者單位:1南京農業大學無錫漁業學院2中國水產科學研究院淡水漁業研究中心

      菌落形態特征

      以肝胰腺為樣本劃線接種于LB瓊脂平板上,30℃培養18h,培養基上長出大量白色菌落,直徑1.5mm,表面光滑,中央隆起。

      回歸感染試驗結果

      用分離菌株DF-1進行人工回感試驗結果見表1。菌液濃度為4×108CFU/mL時試驗魚死亡率為100%,菌液濃度為4×107CFU/mL時試驗魚只有部分死亡。菌液濃度為4×109CFU/mL時試驗魚8h開始死亡,20h時全部死亡,發病魚體表現出自然發病的癥狀。解剖病魚取肝胰腺分離到優勢菌落,經細菌學鑒定為維氏氣單胞菌。

      生理生化特性

      對分離菌株DF-1的生化特性的測定結果歸納見表2。

      16SrRNA基因序列及系統進化關系

      分離菌株DF-1在GenBank的登錄號為:JQ301790,基因序列測序結果16SrRNA基因長度為1453bp。將菌株所擴增的16SrRNA基因序列在NCBI通過Blast進行同源性檢索,結果其與氣單胞菌屬細菌16SrRNA基因序列自然聚類,且與維氏氣單胞菌聚為一個分支,采用鄰接法構建菌株分子發育樹如圖1,分離菌株在系統發育樹上與維氏氣單胞菌(登錄號:JN083778)屬同一支,同源性達99%以上。結合形態學和生理生化特征將所分離菌株鑒定為維氏氣單胞菌。

      藥敏試驗結果

      分離菌DF-1對37種抗生素的藥敏試驗結果見表3。該菌對甲哌利福霉素、鏈霉素、卡那霉素、阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素、新生霉素、氟苯尼考等16種抗生素敏感;對青霉素G、氨芐西林、苯唑西林、紅霉素、萬古霉素、羅紅霉素、氟羅沙星等15種抗生素表現出耐藥性;對O/129弧菌抑制劑不敏感。

      本研究分離得到菌株DF-1,進行人工感染試驗,該菌株表現出較強的致病力,能使健康鯽出現和自然病魚相似的病癥,并從病魚體中分離病原菌,菌體形態特征與菌株DF-1相同,同時生理生化反應以及16SrRNA鑒定為維氏氣單胞菌。目前對于水產養殖動物的疾病大多仍采用抗菌藥物防治的辦法來控制其發生和流行。化學藥物防治容易導致病原菌產生耐藥性,甚至是多重耐藥性[12]。本試驗以37種抗菌藥物對維氏氣單胞菌進行了藥物敏感性測定,結果發現試驗菌株對甲哌利福霉素、鏈霉素、卡那霉素等16種藥中度敏感;而對青霉素、苯唑西林、氨芐西林等15種藥物表現出耐藥性;對弧菌抑制劑O/129不敏感。藥敏試驗結果與唐毅等[13]的結果有所差異,這可能是由于細菌對抗生素類藥物的耐藥性具有頻繁的變異性,加之同一種菌在不同的環境條件下會有不同的藥物敏感性。因此應根據藥敏試驗結果和維氏氣單胞菌的耐藥性合理選擇抗菌藥物進行治療,以減少耐藥菌株的產生。

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