病菌集中營(yíng)

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病菌集中營(yíng)范文第1篇

關(guān)鍵詞：四君子湯； 內(nèi)科疾病； 脾胃氣虛證； 臨床療效

【中圖分類號(hào)】R139+.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1672-8602（2015）04-0498-02

中醫(yī)中四君子湯是一種很古老的方劑，基本中草藥方為甘草?茯苓?白術(shù)和人參，尤其對(duì)于存在脈虛弱?氣短乏力?舌淡苔白和面白食少等癥狀的患者非常適用?由《傷寒論》中的“理中丸”衍化而來(lái)的四君子湯是治療脾胃氣虛證的基礎(chǔ)方，在《太平惠民和劑局方》中進(jìn)行了詳細(xì)的記載[1]?隨著人們生活節(jié)奏逐漸加快和工作壓力的增大，人們的生活方式發(fā)生了很大的變化，加上人們?nèi)狈ψ晕医】当Ｗo(hù)意識(shí)，導(dǎo)致中醫(yī)內(nèi)科疾病脾胃氣虛證發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重影響人們的健康?臨床醫(yī)學(xué)和中醫(yī)藥學(xué)在不斷發(fā)展的過程中，發(fā)現(xiàn)四君子湯對(duì)脾胃氣虛證有很好的治療效果?本文通過分析127例脾胃氣虛證患者的臨床資料，研究四君子湯在中醫(yī)內(nèi)科疾病脾胃氣虛證中的應(yīng)用和治療，以期提高脾胃氣虛證患者的臨床療效，現(xiàn)將研究成果報(bào)道如下?

1 資料和方法

1.1 臨床資料：

將我院從2013年5月―2014年5月收治的共137例脾胃氣虛證患者作為研究對(duì)象，對(duì)所有患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析?將患者隨機(jī)分為對(duì)照組和治療組，對(duì)照組患者57例，治療組患者80例?排除符合以下狀況的患者：1）伴有精神疾病的患者；2）處于哺乳期或妊娠期的婦女；3）存在嚴(yán)重心血管疾病的患者；4）存在病毒?細(xì)菌或真菌感染癥狀的患者[2]?所有患者均確診為脾胃氣虛證，其中女性患者63例，男性患者74例，年齡范圍為21―63歲，平均年齡為（43.2±8.3）歲?兩組患者在年齡?性別?病史及病情等方面無(wú)較大差別，具有可比性（P>0.05）?

1.2 治療方法：

給予對(duì)照組患者常規(guī)治療；治療組患者通過四君子湯進(jìn)行治療，藥方為甘草5g?茯苓?白術(shù)和人參各10g，添加水后煎取服用，分三次服用，1劑/天?所有患者治療周期均為3周，在治療后觀察記錄患者的不良反應(yīng)和復(fù)發(fā)狀況，對(duì)比治療效果?

1.3 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：

無(wú)效：患者的臨床癥狀在治療前后沒有較大變化，治療前后療效指數(shù)下降程度小于20%；有效：患者癥狀有所改善，治療前后療效指數(shù)下降20%―59%；顯效：患者癥狀基本消失，治療前后療效指數(shù)下降60%―89%；痊愈：患者癥狀在治療后全部消失，治療前后療效指數(shù)下降程度大于90%?有效率=顯效率+痊愈率，療效指數(shù)=（治療前積分-治療后積分）/治療前積分×100%?

2 結(jié)果

2.1 兩組患者療效對(duì)比結(jié)果：

進(jìn)行積極的治療后，經(jīng)常規(guī)療法治療的對(duì)照組有效率為67.3%，經(jīng)四君子湯治療的治療組有效率為93.3%，治療組臨床療效明顯優(yōu)于對(duì)照組，兩組對(duì)比數(shù)據(jù)有顯著性差異（x2=16.622，P

2.2 不良反應(yīng)及復(fù)況：

137例脾胃氣虛證患者均完成治療，無(wú)中途退出者，所有患者中無(wú)不良反應(yīng)；治療1個(gè)月后進(jìn)行隨訪觀察，治療組無(wú)復(fù)發(fā)現(xiàn)象，徹底治愈，對(duì)照組4例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)現(xiàn)象，癥狀較輕?

3 討論

脾胃氣虛是脾胃虛弱的基本類型，指的是脾氣不足，失其健運(yùn)而出現(xiàn)的食欲下降?腹瀉?神疲倦怠?腹脹?面色萎黃和舌質(zhì)淡等癥狀，主要是由于勞累過度?飲食無(wú)規(guī)律?久病耗傷脾氣引起的?

四君子湯由甘草?茯苓?白術(shù)和人參四味基礎(chǔ)藥方構(gòu)成，其中甘草味甘，性平，含有黃酮類化合物甘草黃甙?三萜類化合物甘草酸?甘草黃甙等成分，具有鹽皮質(zhì)激素樣作用和糖皮脂激素樣抗炎作用，起到解毒?抗?jié)?鎮(zhèn)咳祛痰的功效，對(duì)中氣不足?脾胃虛弱?腹中攣急作痛?咳嗽氣喘等癥狀的患者療效顯著；茯苓又名茯菟，主要包括三萜類（茯苓酸?茯苓新酸等）?多糖（茯苓聚糖?茯苓次聚等）和無(wú)機(jī)元素等多種成分構(gòu)成，性味歸經(jīng)為甘?淡，平?茯苓不僅具有寧心安神?補(bǔ)中健脾?利水滲濕?抗腫瘤的功效，還能用于痰飲咳嗽，痰濕入絡(luò)，肩背酸痛?心悸?失眠的治療，可以增強(qiáng)機(jī)體免疫力，同白術(shù)?澤瀉及豬苓聯(lián)用對(duì)治療小便不利?水腫漲滿有很好的療效[4]；白術(shù)氣清香，味甘?微辛，具有多項(xiàng)藥用功能，能夠起到補(bǔ)脾益胃?健脾益氣?燥濕利水?止汗等作用，主治脾胃氣弱，由蒼木酮?蒼術(shù)醇及維生素等物質(zhì)構(gòu)成，適用于小便不利?虛脹?泄瀉?食欲下降的病癥；人參是一種主要的強(qiáng)壯滋補(bǔ)藥物，性平?味甘?微苦，適用于健脾益肺，具有補(bǔ)脾益肺?復(fù)脈固脫?生津止渴?安神益智等功效，主治神經(jīng)衰弱?勞傷虛損?心悸?失眠?頭暈?zāi)垦?失眠多夢(mèng)等癥狀，能夠保持中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的穩(wěn)定，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力?

上述多味藥同用則達(dá)到益氣健脾，補(bǔ)益肝腎的效果?通過大量的臨床經(jīng)驗(yàn)與數(shù)據(jù)，現(xiàn)代藥理研究得出結(jié)論：在益氣補(bǔ)中方面，可以采用多種途徑對(duì)甘草?茯苓?白術(shù)和人參加以利用達(dá)到治療效果?該研究表明四君子湯對(duì)治療中醫(yī)內(nèi)科疾病脾胃氣虛證患者有很好的臨床療效，臨床應(yīng)用價(jià)值較高，應(yīng)該普遍推廣?

參考文獻(xiàn)

病菌集中營(yíng)范文第2篇

細(xì)菌性陰道病（BV）是一種由一些厭氧菌和兼性厭氧菌的過度增殖以及正常菌群的減少或缺失所引起的多細(xì)菌性紊亂疾病，是育齡婦女最常見的陰道感染性疾病之一。在臨床上又稱為非特異性陰道炎。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，感染率為30%～50%，發(fā)病率在10%～30%，患者例數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于陰道滴蟲、霉菌等感染人數(shù)，且易復(fù)發(fā)。快速單項(xiàng)唾液酸酶和聯(lián)合測(cè)定試劑法現(xiàn)在已是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)BV的常用方法，我們對(duì)兩法的臨床應(yīng)用價(jià)值作了比較。

1 材料與方法 1.2標(biāo)本采集 用2根無(wú)菌棉拭子采集患者陰道壁下1/3處的盡可能多的分泌物樣本。采樣后立即送檢。標(biāo)本盡快檢測(cè)，放置過久影響檢出率。

1.3檢測(cè)方法 細(xì)菌性陰道病聯(lián)合測(cè)定試劑盒（福建泰普公司）。

單項(xiàng)快速唾液酸苷酶測(cè)定法（天津瑞愛公司）。

按試劑說(shuō)明書操作。

1.4兩法比較 進(jìn)行BV單項(xiàng)快速唾液酸酶法和聯(lián)合測(cè)定試劑法的檢測(cè)結(jié)果比較。對(duì)于上述兩種方法檢測(cè)結(jié)果不同的標(biāo)本，用經(jīng)典檢查項(xiàng)目Amsel診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。

2 結(jié)果

2.1 BV快速單項(xiàng)唾液酸酶法和聯(lián)合測(cè)定試劑法檢測(cè)結(jié)果。 2.2 BV快速單項(xiàng)唾液酸酶法與聯(lián)合測(cè)定試劑法的敏感性和特異性比較 綜合上述兩種方法檢測(cè)結(jié)果不一致的22份標(biāo)本,以經(jīng)典Amsel方法為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷分析。在BV快速單項(xiàng)唾液酸酶法檢測(cè)陽(yáng)性而聯(lián)合檢測(cè)陰性的17例標(biāo)本中，Amsel標(biāo)準(zhǔn)的診斷為13例陰性，4例陽(yáng)性；在聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性而BV快速單項(xiàng)唾液酸酶法檢測(cè)陰性的5例標(biāo)本中，Amsel標(biāo)準(zhǔn)的診斷為4例陽(yáng)性，1例陰性。單項(xiàng)唾液酸酶測(cè)定診斷BV的敏感性93.7%,特異性94.5%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值81.9%,陰性預(yù)測(cè)值98.2%。聯(lián)合測(cè)定診斷BV的敏感性93.7％，特異性99.6％，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值98.3％，陰性預(yù)測(cè)值98.3％。

3 討論

本文介紹的兩種快速診斷法具有敏感度和特異性都較高，速度快，操作簡(jiǎn)便，主觀因素少，可保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，適用于門診病人的快速檢測(cè)，是值得臨床普遍推廣的檢測(cè)方法。

病菌集中營(yíng)范文第3篇

【摘要】 目的 研究鱟試劑凝膠法與家兔測(cè)溫法檢測(cè)抗狂犬病血清不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品中細(xì)菌內(nèi)毒素與熱原試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性，來(lái)確定抗狂犬病血清細(xì)菌內(nèi)毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)。方法 確定內(nèi)毒素的限值和供試品溶液最大有效稀釋倍數(shù)；制備供試品溶液在最大有效稀釋倍數(shù)下作干擾試驗(yàn)；確認(rèn)無(wú)干擾作用后，用鱟試劑凝膠法檢測(cè)抗狂犬病血清不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素的限量檢查，并與家兔測(cè)溫法結(jié)果相對(duì)比。結(jié)果 連續(xù)檢查十批抗狂犬病血清制品細(xì)菌內(nèi)毒素的限量符合規(guī)定，鱟試劑凝膠法與家兔測(cè)溫法試驗(yàn)符合率100%。結(jié)論 用鱟試劑凝膠法對(duì)抗狂犬病血清不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素的限量檢測(cè)為快速、準(zhǔn)確，可用鱟試劑凝膠法代替家兔測(cè)溫法檢測(cè)抗狂犬病血清制品中熱原。

工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四個(gè)濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)內(nèi)毒素濃度平行做4管，另外2管作為陰性對(duì)照管。按凝膠法鱟試劑說(shuō)明書檢查操作進(jìn)行，封閉管口，輕輕搖勻，垂直放入(37±1)℃的恒溫器中，保溫(60±2)min。然后取出觀察結(jié)果。

1.2.1.4 凝膠法干擾試驗(yàn) 取3批經(jīng)熱原檢查法檢測(cè)合格的抗狂犬病血清，根據(jù)MVD將抗狂犬病血清溶液稀釋做為3批供試品溶液，每批取36支鱟試劑，其中16支根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值（λ），將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用供試品溶液溶解，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四個(gè)濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)內(nèi)毒素濃度平行做4管，作為干擾試驗(yàn)系列（E/S系列）；而另16支，也根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值（λ），將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四個(gè)濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)內(nèi)毒素濃度平行做4管，作為鱟試劑標(biāo)示靈敏度的對(duì)照系列（E系列）；把剩余4管，2管作為供試品溶液檢查（S），另外2管作為陰性對(duì)照（NC）。按凝膠法鱟試劑說(shuō)明書檢查操作進(jìn)行，封閉管口，輕輕搖勻，垂直放入(37±1)℃的恒溫器中，保溫(60±2)min。然后取出觀察結(jié)果。

1.2.1.5 凝膠限量試驗(yàn) 將抗狂犬病血清10批制品，按MVD稀釋作為供試品溶液，每批取鱟試劑8支，其中2支作為供試品溶液檢查管（MVD-S）；2支作為供試品陽(yáng)性對(duì)照管（MVD-PPC）；2支作為陽(yáng)性對(duì)照管（PC）；2支作為陰性對(duì)照管（NC）。按凝膠法鱟試劑說(shuō)明書檢查操作進(jìn)行，封閉管口，輕輕搖勻，垂直放入(37±1)℃的恒溫器中，保溫(60±2)min。然后取出觀察結(jié)果。

1.2.1.6 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 將試管從恒溫器中輕輕取出，緩慢倒轉(zhuǎn)180°，若管內(nèi)形成凝膠，并且凝膠不變形、不從管壁滑脫者為陽(yáng)性；未形成凝膠或形成的凝膠不堅(jiān)實(shí)、變形并從管壁畫脫者為陰性。

1.2.2 家兔測(cè)溫法 （依照《中國(guó)藥典》2005年版 三部附錄Ⅻ D檢查）［2］

1.2.2.1 試驗(yàn)前準(zhǔn)備和操作 家兔在檢查前至少1h開始停止給食并置于固定架上，直至檢查完畢。挑選預(yù)測(cè)體溫合格的家兔3只，自家兔耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量的抗狂犬病血清，每隔30min測(cè)體溫一次，共測(cè)6次，根據(jù)體溫升高均值和總和判定結(jié)果。

1.2.2.2 注射劑量 按家兔體重每1kg注射3.0ml。

1.2.2.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 在3只家兔中，體溫升高均低于0.6℃，并且3只家兔體溫升高總和低于1.4℃，認(rèn)為供試品的熱原檢查符合規(guī)定；反之認(rèn)為不符合規(guī)定。

2 結(jié)果

2.1 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn) 將18支鱟試劑試管從恒溫器中輕輕取出，緩慢倒轉(zhuǎn)180°，觀察凝膠是否變形，記錄結(jié)果。計(jì)算反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值，即鱟試劑靈敏度的測(cè)定值λc=0.52EU/ml，由于0.5λ≤λc≤2λ，本批鱟試劑的靈敏度標(biāo)示值正確。結(jié)果見表1。

2.2 凝膠法干擾試驗(yàn) 將每批36支鱟試劑試管從恒溫器中輕輕取出，緩慢倒轉(zhuǎn)180°，觀察凝膠是否變形，記錄結(jié)果。計(jì)算E系列和E/S系列的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值，即Es和Et值，由于Es在0.5～2λ及Et在0.5～2Es之間，則供試品在該濃度下無(wú)干擾作用，結(jié)果見表2。

2.3 抗狂犬病血清二次除菌過濾后細(xì)菌內(nèi)毒素檢查和熱原檢查結(jié)果 將十批抗狂犬病血清，按MVD稀釋作為供試品溶液，將每批8支鱟試劑試管從恒溫器中輕輕取出，緩慢倒轉(zhuǎn)180°，觀察凝膠是否變形，判斷結(jié)果。并與熱原檢查法結(jié)果比較，見表3。

3 討論

鱟試劑凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來(lái)檢測(cè)內(nèi)毒素的方法。熱原是指在臨床上能使哺乳類動(dòng)物產(chǎn)生熱原反應(yīng)的物質(zhì)；細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的產(chǎn)物，具有多種生物活性，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是脂多糖，為熱原的主要來(lái)源，能引起機(jī)體發(fā)熱。熱原與細(xì)菌內(nèi)毒素的關(guān)系是包含與被包含的關(guān)系，在藥品檢定范疇，可以說(shuō)無(wú)細(xì)菌內(nèi)毒素就無(wú)熱原；在藥品生產(chǎn)范疇，控制細(xì)菌內(nèi)毒素就是控制熱原。藥品和生物制品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查取代熱原檢查已成為必然的趨勢(shì)。傳統(tǒng)家兔測(cè)溫法不僅檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，樣品用量多，并存在較多的干擾因素。另外，家兔的人工飼養(yǎng)和居住條件等經(jīng)費(fèi)大，成本高，也存在一定問題。鱟試劑是一種生物制劑，鱟試劑凝膠法檢查細(xì)菌內(nèi)毒素具有快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、靈敏度高、再現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于《中國(guó)藥典》2005年版 三部生物制品的檢定中［2］。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)、三批抗狂犬病血清凝膠法干擾試驗(yàn)和十批抗狂犬病血清細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，結(jié)果表明，供試品溶液和檢查用水對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無(wú)干擾作用，制品的鱟試劑凝膠法檢查結(jié)果與家兔測(cè)溫法結(jié)果相同，兩方法比較，結(jié)果符合率為100%。生物制品檢測(cè)的持續(xù)性和復(fù)雜性等決定了要對(duì)每個(gè)指標(biāo)的檢測(cè)做實(shí)際驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)［3］。兩者檢測(cè)結(jié)果一致，表明應(yīng)用鱟試劑凝膠法對(duì)抗狂犬病血清不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)和質(zhì)量控制是可行的。此方法快速、準(zhǔn)確，能作到時(shí)時(shí)監(jiān)控，能獲得即經(jīng)濟(jì)又安全、有效和可控的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

1 Moesby L，Hansen EW，Christensen JD.Endotoxin testing of proteins for administration using the Mono Mac 6 assay.J Clin Pharm Ther，2000，25(4):283-289.

病菌集中營(yíng)范文第4篇

摘 要 目的：探討高敏C反應(yīng)蛋白在早產(chǎn)兒細(xì)菌感染性疾病的診斷意義。方法：2012年3月-2014年1月收治早產(chǎn)兒感染30例，作為觀察組。收集同期分娩的健康兒童30例，作為對(duì)照組，對(duì)兩組進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：觀察組hs-CRP（14.66±4.69）mg/L，對(duì)照組hs-CRP（2.46±0.83）mg/L，觀察組明顯高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

關(guān)鍵詞 早產(chǎn)兒 感染 高敏C反應(yīng)蛋白

Significance of high-sensitivity C-reactive protein in the diagnosis of bacterial infectious diseases in preterm neonates

Zhang Yingchun

The People's Hospital of Guazhou County，Gansu 736100

Abstract Objective：To explore the diagnostic significance high-sensitivity C-reactive protein in the bacterial infectious diseases in preterm neonates.Methods：30 cases of rremature infant patients were selected as the observation group from March 2012 to January 2014.30 cases of delivery of healthy children at the same time were collected as the control group.The two groups were compared and analyzed.Results：The hs CRP of the observation group was 14.66 ±4.69 mg/L.The hs CRP of the control group was 2.46±0.83 mg/L.The observation group is significantly higher than the control group，and the difference was statistically significant （P

Key words Preterm neonates；Infection；High-sensitivity C-reactive protein

早產(chǎn)兒感染是由于產(chǎn)婦、早產(chǎn)兒以及生產(chǎn)過程中等因素導(dǎo)致的感染，是早產(chǎn)兒常見的疾病，高敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP）是人體的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在機(jī)體發(fā)生急性感染時(shí)，高敏C反應(yīng)蛋白明顯升高。早產(chǎn)兒不同于正常新生兒，其感染是否存在高敏C反應(yīng)蛋白明顯升高等臨床意義是值得討論的課題[1]。為此，筆者收集我院2012年3月-2014年1月治療的30例早產(chǎn)兒患者進(jìn)行總結(jié)和分析。

資料與方法

2012年3月-2014年1月收治早產(chǎn)兒感染30例作為觀察組，男18例（60.0%），女12例（40.0%），胎齡30+2～36周，平均33+3周，出生體重1 052～2 577g，平均3 633g。收集同期分娩的健康兒童30例，作為對(duì)照組。對(duì)兩組進(jìn)行對(duì)比分析。

方法：所有入組患兒都給予抽取靜脈血，檢查hsCPR，對(duì)于觀察組的患兒，還要給予血液、尿液、呼吸道分泌物等標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用（x±s）形式表示，計(jì)量資料采取t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。當(dāng)P

結(jié) 果

兩組新生兒hsCRP試驗(yàn)結(jié)果比較：觀察組hs-CRP（14.66±4.69）mg/L，對(duì)照組hs-CRP（2.46±0.83）mg/L，觀察組明顯高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

患兒細(xì)菌培養(yǎng)情況：本組30例患者采用大便細(xì)菌培養(yǎng)5例（16.7%），采用尿液細(xì)菌培養(yǎng)10例（33.3%），進(jìn)行血液細(xì)菌培養(yǎng)7例（23.3%），進(jìn)行痰液細(xì)菌培養(yǎng)4例（13.3%），采用咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)4例（13.3%）。均培養(yǎng)出致病菌。各細(xì)菌分類：革蘭陽(yáng)性菌株18株（60.0%），其中表皮葡萄球菌8例，金黃色葡萄球菌9例（50.0%），溶血葡萄球菌1株。革蘭陰性菌株12株（40.0%），其中大腸埃希菌5株，肺炎克雷伯桿菌4株，陰溝腸桿菌2例，產(chǎn)酸克雷伯桿菌1株。

討 論

由于我國(guó)人口眾多，兒童患者較多，其中在新生兒監(jiān)護(hù)病房的患者中，早產(chǎn)兒占>50%。在某種程度上，早產(chǎn)兒尤其是極低體重兒的救治成活率代表著一個(gè)國(guó)家新生兒重癥監(jiān)護(hù)的水平[2]。在新生兒期，早產(chǎn)兒感染性敗血癥是導(dǎo)致患兒死亡的主要原因之一，特別是早產(chǎn)兒細(xì)菌感染敗血癥。為了降低早產(chǎn)兒感染患者的死亡率，提到救治成活率，應(yīng)該重視對(duì)疾病的監(jiān)測(cè)和早期診斷。早期診斷為下一步的治療提供的理論基礎(chǔ)，而治療的關(guān)鍵是及時(shí)給予有效的抗生素治療。

在早產(chǎn)兒感染的診斷中，血培養(yǎng)是金標(biāo)準(zhǔn)，但血培養(yǎng)檢查出結(jié)果較慢，最快也要36～48小時(shí)，而且檢查的結(jié)果還受到多種因素的影響，如細(xì)菌的種類，檢查前的用藥及血培養(yǎng)的技術(shù)水平。血培養(yǎng)檢查的陽(yáng)性率較低，很多有明顯感染癥狀的患兒，其血培養(yǎng)結(jié)果可能是陰性[3]。在臨床中，未被治療的早產(chǎn)兒感染性敗血癥死亡率高達(dá)50%，所以人們已認(rèn)識(shí)到了等待血培養(yǎng)結(jié)果指導(dǎo)治療的危害性，加之血培養(yǎng)檢查結(jié)果較慢，不能較好指導(dǎo)早期臨床用藥[4，5]。

近年來(lái)，在細(xì)菌感染的診斷中，CRP、白細(xì)胞及血沉等間接實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)中，CRP廣泛被應(yīng)用于臨床工作。在采用高敏感CRP（hsCRP）測(cè)定法反映炎癥的情況時(shí)，hsCRP比CRP更敏感。本研究結(jié)果顯示，觀察組hs-CRP（14.66±4.69）mg/L，對(duì)照組hs-CRP（2.46±0.83）mg/L，觀察組明顯高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

因此，高敏C反應(yīng)蛋白在早產(chǎn)兒細(xì)菌感染性疾病診斷中具有重要的意義，值得在臨床中推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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病菌集中營(yíng)范文第5篇

關(guān)鍵詞：馬鈴薯（Solanum tuberosum）；晚疫病病原菌（Phytophthora infestans）；水楊酸；乙烯；基因表達(dá)

中圖分類號(hào)：S532；Q786；S435.32 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）17-4238-03

Effects of Infection of Phytophthora infestans on Gene Expressions of Key Enzymes in Salicylic Acid and Ethylene Biosynthesis in Potato

ZHU Jia-li1，DING Yan1，XU Hong-zhang1，XIN Cui-hua1，CAI Lu1，XIAO Huan-huan1，

HE Yan-hong2，LI Na1，GUO Jiang-bo1

（1. Inner Mongolia Key Laboratory of Biomass-Energy Conversion/School of Mathematics， Physics and Biological Engineering， Inner Mongolia University of Science and Technology， Baotou 014010， Inner Mongolia， China； 2. Forestry College， Inner Mongolia Agricultural University， Huhhot 010020， China）

Abstract： Phenylalanine ammonia-lyase（PAL） and 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid（ACC） synthase（ACS） are the key enzymes in the biosynthesis pathway of salicylic acid and ethylene respectively. Expression patterns of gene encoding these key enzymes（poPAL and poACS） in potato（Solanum tuberosum） were investigated by semi-quantitative RT-PCR after injection of Phytophthora infestans physiological strain 89148-9 to potato transgenic resistant strains DR1， DR3a and wild susceptive line DG. The results showed that expression of poPAL and poACS genes was increased in leaves of the three potato lines after inoculation of P. infestans. The expression level in transgenic lines was mostly higher than that in wild line and the peak value in transgenic lines generally appeared earlier to that in wild line. The results suggested that poPAL and poACS were related with the resistance to late blight in potato； but the expression models were different between transgenic lines and wild line， which might be responsible for resistance or susceptibility to P. infestans.

Key words： potato（Solanum tuberosum）； Phytophthora infestans； salicylic acid； ethylene； gene expression

收稿日期：2012-08-27

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31260344）；內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2011BS0506，2012MS0301）；高等學(xué)校科學(xué)研究項(xiàng)目

（NJZZ11139）；內(nèi)蒙古科技大學(xué)李保衛(wèi)大學(xué)生科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目；教育廳“青年科技英才支持計(jì)劃”項(xiàng)目

作者簡(jiǎn)介：朱佳莉（1990-），女，江蘇丹陽(yáng)人，在讀本科生，生物技術(shù)專業(yè)；通訊作者，郭江波（1976-），男，內(nèi)蒙古呼和浩特人，副教授，博士，

主要從事植物抗逆分子生物學(xué)研究，（電話）15044701654（電子信箱）。

馬鈴薯（Solanum tuberosum）是世界第四大糧食作物，在緩解全球糧食安全問題中占有重要的地位[1]。馬鈴薯晚疫病則是限制馬鈴薯生產(chǎn)的第一大病害，給馬鈴薯產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重的損失，培育優(yōu)良的抗病品種、探明其抗病機(jī)制意義重大。

植物在受到病原菌的侵染后其體內(nèi)會(huì)發(fā)生一系列生理生化反應(yīng)以降低病害造成的傷害。其中體內(nèi)產(chǎn)生信號(hào)分子進(jìn)而誘導(dǎo)一系列防衛(wèi)基因表達(dá)和代謝變化是植物抗病行而有效的方法之一。水楊酸（Salicylic acid，SA）和乙烯是植物體內(nèi)重要的信號(hào)分子，可以誘導(dǎo)植物的抗病反應(yīng)[2，3]。本研究以通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得的2個(gè)馬鈴薯抗晚疫病株系DR1、DR3a和野生型株系DG為材料，利用水楊酸合成途徑中的關(guān)鍵酶——苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanineammonialyase，PAL）基因（poPAL）和乙烯合成途徑中的關(guān)鍵酶——1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（1-Aminocyclopropane-1-carboxylic acid，ACC）合成酶（1-Aminocyclopropane-1-carboxylate synthase，ACS）基因（poACS）的保守區(qū)設(shè)計(jì)特異引物，通過半定量RT-PCR研究接種晚疫病病原菌（Phytophthora infestans）生理小種89148-9后各株系中兩種酶基因的表達(dá)情況，為深入了解馬鈴薯抗晚疫病能力與水楊酸和乙烯信號(hào)分子介導(dǎo)植物抗病防衛(wèi)反應(yīng)之間的關(guān)系提供一定的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以前期試驗(yàn)獲得的轉(zhuǎn)基因抗晚疫病馬鈴薯株系DR1、DR3a和野生型株系DG為材料，采用苗缽（10 cm×10 cm）溫室培養(yǎng)。取生長(zhǎng)8～10周的植株為接種對(duì)象。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 馬鈴薯接種晚疫病病原菌 ①制備游動(dòng)孢子。將生長(zhǎng)14 d的晚疫病病原菌生理小種89148-9的孢子囊用無(wú)菌水沖洗到滅菌培養(yǎng)皿中，在4 ℃冰箱中放置6 h使其釋放游動(dòng)孢子，然后鏡檢游動(dòng)孢子濃度并稀釋調(diào)整到終濃度為5×104 個(gè)/mL用于接種。②接種。每株系只取中上部3片葉接種，每片葉接種20 μL游動(dòng)孢子液，接種后置于接種箱培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為18～25 ℃、光照16 h/d，接種后24 h內(nèi)用塑料膜覆蓋保持100%的相對(duì)濕度，分別于接種后0、12、24、48、72 h取樣用于poPAL和poACS基因表達(dá)量的分析。

1.2.2 基因特異引物設(shè)計(jì) 根據(jù)GenBank中發(fā)表的poPAL（序列號(hào)Z37106）和poACS（序列號(hào)AB041521）基因序列，使用軟件Prime 5.0設(shè)計(jì)特異引物，引物序列分別為poPAL，5′-GCTAGAGGTGCT

AGTGCTAAGGGATT-3′和5′-TTTGAAACCCTAGA

TAAGGAAATGGC-3′；poACS，5′-TCCTGGTGATGC

ATTTCTAGTTCCT-3′和5′-ATCCATCCAAATAAA TAGGCCAGCAT-3′。

1.2.3 目的基因半定量RT-PCR分析 植物總RNA采用天根生化科技（北京）有限公司植物總RNA提取試劑盒RNAprep法提取，cDNA的合成按照普洛麥格（北京）生物技術(shù)有限公司的M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶操作說(shuō)明進(jìn)行。各株系cDNA濃度通過內(nèi)標(biāo)引物（poactin，5′-GATGGTGTCAGCCACAC-3′和5′-ATTCCAGCAGCTTCCATTCC-3′）來(lái)調(diào)整，然后以該cDNA為模板擴(kuò)增。反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃ 4 min；94 ℃ 45 s，60 poPAL/57 poACS ℃ 45 s，72 ℃ 70poPAl（poactin）/40poACS s。PCR產(chǎn)物用1.2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。RT-PCR半定量積分分析使用GelPro 60分析軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 接種晚疫病病原菌后各株系poPAL基因的表達(dá)情況

接種晚疫病病原菌生理小種89148-9對(duì)3個(gè)馬鈴薯株系poPAL基因的表達(dá)都有持久的誘導(dǎo)作用，從3個(gè)株系中都擴(kuò)增出了長(zhǎng)度約為1.2 kb的產(chǎn)物。對(duì)RT-PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)（圖1）和半定量積分分析（圖2）發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因DR1株系中poPAL基因的表達(dá)量在接種后24 h時(shí)達(dá)到最大，然后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)其表達(dá)量迅速下降，到72 h時(shí)該基因的表達(dá)量顯著低于接種前水平；轉(zhuǎn)基因DR3a株系中poPAL基因的表達(dá)量也在接種后24 h時(shí)達(dá)到最大，并保持一段時(shí)間的高表達(dá)量然后緩慢下降；野生型DG株系中poPAL基因表達(dá)量在接種后12 h時(shí)達(dá)到最大，到48 h時(shí)仍保持在相對(duì)穩(wěn)定的水平上，接種72 h后該基因的表達(dá)量略低于接種前水平。除72 h時(shí)轉(zhuǎn)基因DR1株系中poPAL基因的表達(dá)量與野生型DG株系相當(dāng)外，接種晚疫病病原菌后72 h內(nèi)轉(zhuǎn)基因DR1和DR3a株系中poPAL基因的表達(dá)量均明顯高于野生型DG株系。

2.2 接種晚疫病病原菌后各株系poACS基因的表達(dá)情況

接種晚疫病病原菌生理小種89148-9對(duì)3個(gè)馬鈴薯株系poACS基因的表達(dá)都有明顯的誘導(dǎo)作用，從3個(gè)株系中都擴(kuò)增出了長(zhǎng)度為681 bp的產(chǎn)物。對(duì)RT-PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)（圖3）和RT-PCR半定量積分分析（圖4）可以看出，DR1株系在接種后12 h時(shí)poACS基因的表達(dá)量達(dá)到最大，在12～48 h內(nèi)一直保持較高的表達(dá)水平，然后逐漸下降，但72 h時(shí)其表達(dá)量仍高于接種前；轉(zhuǎn)基因DR3a株系接種后12 h poACS基因表達(dá)量迅速升高，24 h時(shí)poACS基因的表達(dá)量略有升高，但與12 h時(shí)沒有顯著差異，之后poACS基因的表達(dá)量逐漸下降，到72 h時(shí)其表達(dá)量低于接種前水平；野生型DG株系接種后24 h時(shí)poACS基因的表達(dá)量達(dá)到最大，然后逐漸下降，到72 h時(shí)poACS基因的表達(dá)量已檢測(cè)不到。在整個(gè)觀察期內(nèi)，轉(zhuǎn)基因DR1和DR3a株系中poACS基因的表達(dá)量遠(yuǎn)高于野生型DG株系，而且轉(zhuǎn)基因株系中的誘導(dǎo)為連續(xù)誘導(dǎo)，而野生型為不連續(xù)誘導(dǎo)，在接種后72 h時(shí)該基因不表達(dá)。

3 小結(jié)與討論

水楊酸在植物的系統(tǒng)獲得性抗性中是必不可少的信號(hào)物質(zhì)[4]，研究發(fā)現(xiàn)增加內(nèi)源水楊酸表達(dá)量或者外施水楊酸都可以誘導(dǎo)系統(tǒng)獲得性抗性[5-7]。本研究發(fā)現(xiàn)，接種晚疫病病原菌生理小種89148-9后，在馬鈴薯轉(zhuǎn)基因株系和野生型株系中都誘導(dǎo)了poPAL基因的表達(dá)，表明水楊酸可能是馬鈴薯抗晚疫病過程中重要的信號(hào)分子，這與前人的研究結(jié)果[8]一致。但同一株系不同時(shí)間和不同株系同一時(shí)間該基因的表達(dá)量存在一定的差異，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因株系可能通過調(diào)控poPAL基因誘導(dǎo)表達(dá)的強(qiáng)度來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)晚疫病的抗性。

在高等植物中，ACC經(jīng)ACS或者ACC氧化酶（ACO）合成乙烯，它們是乙烯合成途徑的關(guān)鍵酶，而ACS和ACO受生物脅迫或者非生物脅迫正調(diào)控[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，在接種晚疫病病原菌生理小種89148-9后，在馬鈴薯轉(zhuǎn)基因和野生型株系中都誘導(dǎo)了poACS基因的表達(dá)，表明乙烯可能是馬鈴薯抗晚疫病過程中重要的信號(hào)分子，這與之前的報(bào)道一致[10]。但同一株系不同時(shí)間和不同株系同一時(shí)間該基因表達(dá)量有一定的差異，這說(shuō)明轉(zhuǎn)基因株系可能通過對(duì)該基因誘導(dǎo)表達(dá)的強(qiáng)度和時(shí)序的調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)其對(duì)晚疫病的抗性。

本研究選用的2個(gè)轉(zhuǎn)基因株系和野生型株系在接種晚疫病病原菌后都啟動(dòng)了水楊酸和乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，只是啟動(dòng)的強(qiáng)弱和時(shí)序上有較大的差異。這表明并非只有抗病株系才啟動(dòng)防御反應(yīng)機(jī)制，而是在植物與病原菌互作中，植物都具有潛在的防御反應(yīng)機(jī)制，這些防御反應(yīng)基因通過識(shí)別、信號(hào)傳遞和誘導(dǎo)，使植物自身防御系統(tǒng)被激活而相關(guān)防御反應(yīng)基因被誘導(dǎo)表達(dá)[11，12]。同時(shí)也支持了有關(guān)水楊酸和乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在抗病防御反應(yīng)機(jī)制中的復(fù)雜性和可能存在多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑復(fù)雜的交叉與重疊作用的結(jié)論。但是各株系接種晚疫病病原菌后相關(guān)基因的啟動(dòng)強(qiáng)度與時(shí)序性有較大的差異，這可能是由于不同植物與病原菌所組成的不同互作系統(tǒng)引起的，也可能就是抗、感晚疫病的原因所在。

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